Kraujo tyrimas tms, kas tai yra

Dietos

Tandeminė masių spektrometrija (TMS) yra vienas iš modernių junginių analizės metodų, kuris plačiai naudojamas įvairiems moksliniams ir praktiniams tikslams. Šis metodas leidžia analizuoti kelis šimtus junginių biologinės medžiagos pėdsakuose.

Kur taikomas šis metodas?

Pasaulinės visuomenės sveikatos praktikoje šis metodas yra naudojamas atliekant paveldimos medžiagų apykaitos ligų (NBO) naujagimių masę. Džiovinto kraujo vietoje yra įmanoma nustatyti aminorūgščių (įskaitant fenilalaniną) ir acilkarnitinų kiekį. Kiekybinis šių medžiagų nustatymas leidžia išskirti keletą dešimčių paveldimų ligų, priklausančių įvairioms NBO klasėms (amino rūgščių metabolizmo sutrikimai, organinės rūgštys ir riebalų rūgščių mitochondrijų β-oksidacijos defektai). Remiantis užsienio literatūros duomenimis, jų bendras dažnis yra 1: 2000 gyvų naujagimių. Ir anksčiau, šių sutrikimų diagnostika reikia daug biologinės medžiagos, kelis tyrimus (aminorūgščių analizę, dujų chromatografija-spektrometrija nustatymas acylcarnitines spektro), kurios, reikalingus daug laiko ir medžiagų sąnaudas. TMS leidžia kiekybiškai įvertinti visus šiuos junginius vienoje analizėje!

Kokias ligas galima nustatyti naudojant šį metodą?

Deja, dar nėra visuotinio labai jautrios ir specifinės visų žinomų NBO diagnozavimo testų, tačiau technologijos, kuriomis siekiama nustatyti kelis dešimtys ar net šimtus ligų vienoje analizėje, jau tampa realybe. Šie metodai apima TMS. Šis metodas leidžia su dideliu pasitikėjimu aptikti apie 40 paveldimų aminorūgščių, organinių rūgščių ir riebalų rūgščių mitochondrijų beta oksidų metabolinių sutrikimų. Dauguma šių ligų atsiranda naujagimiui. Ligos, kurias galima diagnozuoti naudojant šią technologiją, sąrašas pateikiamas analizės skyrelyje http://labnbo.ru/prajs-list

Kodėl būtina kuo anksčiau diagnozuoti medžiagų apykaitos ligas?

Daugelis gydytojų klaidingai mano, kad NBO yra tokios retos, kad jas reikėtų išskirti tik paskutinį kartą, o labai dažnai teisinga diagnozė nustatoma jau vėlesniuose etapuose arba nėra nustatyta diagnozuojama liga.

Tačiau jau žinoma daugiau nei 150 NBO formų, kurių veiksmingi terapijos metodai buvo sukurti, o paciento gyvenimas ir sveikata labai priklauso nuo to, kaip greitai ir teisingai diagnozuojama. Dėl 20 ligų, kurias galima diagnozuoti naudojant TMS, buvo sukurtas specialus gydymas. Diagnozuotas laikas - išsaugotas paciento gyvenimas ir sveikata!

Kraujo mėginių surinkimo taisyklės

Kraujas surenkamas naudojant standartinę filtravimo kortelę (№903), kuri naudojama PKU jaunikliams tikrinti. Kraujas gali būti arba kapiliarinis (piršto, kulno) arba venų. Būtina gerai filtruoti pasirinktą plotą! Filtro kortelėje turi būti aiškiai nurodyta, iš kur ir iš kur pacientas buvo išsiųstas pacientas, gimimo data ir telefono numeris. Mėginys džiovinamas 2-3 valandas ore. Patartina pridėti istorijos ištrauką.

Tinkamo kraujo surinkimo pavyzdys:

Nepageidaujamo kraujo mėginių ėmimo pavyzdžiai:

Daug smulkių daiktų

Mėginys nebuvo visiškai išdžiovinamas, todėl pervežimo metu mėginys buvo neryškus.

Filtro popierius buvo silpnai įsiurbęs kraujyje.

Naudingos nuorodos:

(NCBI) yra nacionalinis molekulinės biologijos informacijos šaltinis, įkurtas 1988 m. PubMed duomenų bazėje yra daugiau kaip 15 000 000 straipsnių iš įvairių biomedicinos žurnalų (anglų kalba).

Žmogaus genų ir genetinių ligų katalogas, kurį sukūrė dr. V. A. McKusick ir jo kolegos (anglų k.).

(SSIEM) - Visuomenės paveldimų metabolinių ligų tyrimas (įgimtosios metabolinės klaidos).

Federalinės valstybinės biudžeto mokslo institucija "Medicininės genetikos tyrimų centras"

Informacinis portalas apie retas ligas, jų gydymo galimybes ir diagnozę pacientams, sergantiems retomis ligomis

Visuomeninė retųjų ligų draugija buvo įkurta 2012 m. Pacientų, jų šeimų ir ekspertų iniciatyva. Šiandien PSO organizacija sujungia daugiau nei 400 pacientų iš 47 Rusijos Federacijos regionų su 63 retų ligų.

Kraujo tyrimas tms, kas tai yra

Daugelį metų atranka daugiausia buvo atliekama su kiekvienos atskiros ligos tyrimais. Pavyzdžiui, PKU tyrimas buvo pagrįstas mikrobiologiniu arba cheminiu fenilalanino kiekio padidėjimo vertinimu.

Per pastarąjį dešimtmetį ši situacija visiškai pasikeitė, kai atsirado tandemo masių spektrometrijos (TMS) technologija. Tandeminės masės spektrometrijos (TMS) analizė gali ne tik tiksliai ir greitai atskleisti padidėjusį fenilalaniną kraujo dėmėje naujagimyje, kuriame yra mažiau klaidingai teigiamų atsakymų, palyginti su senais metodais, bet taip pat galima nustatyti keliasdešimt kitų biocheminių sutrikimų.

Kai kurie iš jų jau buvo patikrinti individualiais bandymais. Pavyzdžiui, daugelis valstybių naudojo specialius bandymus aptikti didesnį metioninas, aptikti porinis masės spektrometrija (TMS), taip pat buvo ne patikimas metodas patikros-onatalnogo tam tikrų ligų atitinkamų patikrinimo kriterijų, tačiau neturėjo patikimą testą anksčiau.

Pavyzdžiui, MCAD trūkumas yra riebalų rūgščių oksidacijos liga, paprastai besimptomė, bet kliniškai nustatoma, kai pacientas padidina katabolizmą. MCAD deficito nustatymas gimdant gali būti gyvybiškai svarbus, nes sergantiems vaikams ankstyvoje vaikystėje yra labai didelis gyvybei pavojingos hipoglikemijos pavojus, esant katabolinėms ligoms, kurias sukelia įtampos ligos, tokios kaip virusinė infekcija.

Pirmojoje hipoglikemijos epizėje miršta beveik ketvirtadalis vaikų, kuriems diagnozuotas MCAD trūkumas. Tinkamai gydant, metabolinis sutrikimas gali būti sustabdytas. MCAD trūkumas, kai pagrindinis tikslas atrankos - įspėjimas tėvams ir gydytojams apie medžiagų apykaitos dekompensacijos rizika, kaip vaikai tarp seansų beveik sveika ir nereikia kasdien gydyti, išskyrus išimtis ilgalaikis badavimas.

Tačiau tandemo masių spektrometrijos (TMS) naudojimas naujagimių atrankoje lieka abejonių. Be to, teikiant greitą testavimą daug sutrikimų, naujagimių patikros dėl kurių jau yra daroma arba gali būti pateisinamas, tandemas masių spektrometrija (TMS) taip pat nurodoma kūdikius su paveldimų medžiagų apykaitos, pavyzdžiui, methylmalonic acidemia, paprastai nėra įtrauktos į patikros programą, nes jų retumo ir teikti sunkumų galutinis gydymas, kuris apsaugo nuo progresuojančio neurologinio pablogėjimo.

Tandeminės masės spektrometrijos metu aptiktos ligos

I. Aminoacidemija:
- PKU
- Šlapimo liga su klevo sirupu
- Homocistinurija
- Citrullinemia
- Arginino cukraus acidurija
- Tyrosinemija I tipo

Ii. Organinė rūgštis:
- Propioninė rūgštis
- Metilmalono rūgštis
- Isovaleric Acidemia
- Izoliuota 3-metilkortonilglicinimine
- Glutaric acidemia (I tipo)
- Mitochondrijų acetoacetyl-coA-tiolazės trūkumas
- Hidroksimetilglutaric acidemia
- Daugelio CoA-karboksilazės gedimas

III. Riebiųjų rūgščių oksidacijos pažeidimai:
- SCAD gedimas
- Hidroksido trūkumas
- MCAD nepavyko
- VLCAD nepavyko
- LCAD trūkumas ir trifunkcinis baltymų trūkumas
- Glutaric acidemia II tipo
- Karnitino palmitoidltransferazės II trūkumas

Tandeminė masės spektrometrija (TMS) taip pat gali nustatyti neįprastus metabolitus su nenustatyta sveikumo verte. Pavyzdžiui, SCAD trūkumas yra kita riebalų rūgščių oksidacijos liga, dažniausiai besimptomė, nors kai kuriems pacientams gali pasireikšti sunkumai su epizodine hipoglikemija. Taigi teigiamos tandeminės masės spektrometrijos (TMS) analizės prognozinė reikšmė simptominiam SCAD gali būti labai maža.

Ar SCAD trūkumo aptikimo pranašumas yra didesnis negu neigiamas testo poveikis, dėl kurio dauguma naujagimių turi teigiamą testo rezultatą, dėl kurio niekada nebuvo klinikinių simptomų? Taigi, ne kiekviena tandeminės masės spektrometrijos (TMS) aptikta liga atitinka naujagimių atrankos kriterijus.

Štai kodėl kai kurie sveikatos priežiūros sistemos ekspertai teigia, kad tėvams ir gydytojams reikia žinoti tik apie metabolitų, kurių klinikinė nauda yra įrodyta, nukrypimus. Kita pasisako už visą pateiktą tandemo masių spektrometrijos (TMS), ir teikia informaciją naudojimas nesvarbu, kaip gerai, kad liga kriterijai atitinka standartą naujagimių patikros informuoti gydytojus ir tėvus visi nenormalūs metabolitų. Ateityje galėsite atidžiai stebėti pacientus, kurių anomalijos yra nežinomos. Dėl visų šių priežasčių tandeminės masės spektrometrijos (TMS) naudojimas naujagimių atrankai išlieka diskusijų tema.

Gyventojų patikrinimui prenataliniame laikotarpyje paprastai naudojami du tyrimai: chromosomų analizė vyresnio amžiaus moterims ir AFP motinos serumas arba trigubas DNT ir chromosomų aneuploidijos tyrimas.

Jei nėštumas gresia pavojus dėl per - invazinių procedūrų prenatalinė diagnostika chromosomų aneuploidies dėl motinos amžius, taip pat turėtų pasiūlyti papildomą patikrinimą, pavyzdžiui, nustatant AFP lygių amniono, genomo lyginamoji hibridizacija ieškoti pavojingų submicroscopic trynimų, mutacijų atranka dėl cistinės fibrozės ir kitų bendrų negalavimų.

Kraujo tyrimas tms, kas tai yra

Tandeminė masių spektrometrija yra vienas iš modernių junginių analizės metodų, kuris plačiai naudojamas įvairiems moksliniams ir praktiniams tikslams. Šis metodas leidžia analizuoti kelis šimtus junginių biologinės medžiagos pėdsakuose. Pasaulio visuomenės sveikatos praktikoje šis metodas yra naudojamas masinei sergant paveldimoms medžiagų apykaitos ligoms (NBO). Džiovinto kraujo vietoje yra įmanoma nustatyti aminorūgščių (įskaitant fenilalaniną) ir acilkarnitinų kiekį. Kiekybinis šių medžiagų nustatymas leidžia išskirti keletą dešimčių paveldimų ligų, priklausančių skirtingoms klasėms NBO (aminorūgščių, organinių rūgščių ir organinių rūgščių metabolizmo sutrikimų bei riebalų rūgščių mitochondrijų b-oksidacijos defektų defektus). Anksčiau šių sutrikimų diagnozei reikėjo didelės biologinės medžiagos, keli tyrimai (aminorūgščių analizė, dujų chromatografija / masių spektrometrija, acilkarnitinų spektro nustatymas), kuriems reikėjo daug laiko ir materialinių sąnaudų. TMS leidžia kiekybiškai įvertinti visus šiuos junginius vienoje analizėje! Paveldimieji aminorūgščių metabolizmo sutrikimai, organinės rūgštys ir riebalų rūgščių mitochondrijų beta oksidacijos defektai susideda iš maždaug 100 nosologinių formų, daugiausia pasireiškiančių naujagimių laikotarpiu. Jų dažnis yra daugiau nei 1: 5000 gyvų naujagimių. Daugelis gydytojų klaidingai mano, kad šios grupės ligos yra tokios retos, kad jas reikėtų išskirti tik paskutinį kartą, o labai dažnai teisinga diagnozė nustatoma jau vėlesniuose etapuose, arba liga nėra diagnozuota.

Atliekant analizę nustatomi 52 rodikliai (amino rūgštys ir acilkarninos)

Bandymo medžiaga: kapiliarinis kraujas sausoje formoje

Pasirengimas studijai: ne

Priėmimo dienos: medicinos centro darbo valandomis

№ НБО1, naujagimių atranka. "PINGULUS" (aminorūgščių ir acilkarnitinų spektro analizė)

  • Panašūs ligos atvejai šeimoje.
  • Vaikų ankstyvo amžiaus šeimoje mirties atvejai.
  • Staigus vaiko būklės pablogėjimas po trumpo normalaus vystymosi laikotarpio (asimptominis laikotarpis gali būti nuo kelių valandų iki kelių savaičių).
  • Neįprastas kūno ir / ar šlapimo kvapas ("saldus", "pele", "virti kopūstai", "prakaito kojos" ir tt).
  • Neurologiniai sutrikimai - sąmonės sutrikimai (mieguistumas, koma), įvairūs konvulsiniai priepuoliai, raumenų tonuso pokyčiai (raumenų hipotonija ar spazzinis tetraparesis).
  • Kvėpavimo ritmo sutrikimai (bradypnea, tachypnea, apnėja).
  • Kitų organų ir sistemų sutrikimai (kepenų pažeidimas, hepatosplenomegalija, kardiomiopatija, retinopatija).
  • Kraujo ir šlapimo laboratorinių parametrų pokyčiai - neutropenija, anemija, metabolinė acidozė / alkalozė, hipoglikemija / hiperglikemija, padidėjęs kepenų fermentų aktyvumas ir kreatinfosfokinazės, ketonurijos lygis.
  • Papildoma 37 paveldimų medžiagų apykaitos ligų diagnostika kartu su privaloma valstybine programa 5 paveldimų ligų nustatymui: naujagimių atranka: "PECHET".

Tyrimo rezultatų interpretacija yra informacija gydytojui, kuris nėra diagnozė. Šiame skyriuje pateikta informacija negali būti naudojama savireguliavimui ir savigarbai. Gydytojas tiksliai diagnozuoja diagnozę, naudodamasi šio tyrimo rezultatais ir būtina informacija iš kitų šaltinių: anamnezė, kitų egzaminų rezultatai ir kt.

Matavimo vienetai laboratorijoje INVITRO: μmol / l.

HEREDITORINIŲ LIGŲ CHEMINIŲ MEDŽIAGŲ LABORATORIJA

Indikacijos TMS analizei

Gali būti sunku nustatyti įgimtų aminorūgščių, organinių rūgščių ir mitochondrijų b-oksidacijos defektų klinikinę diagnozę, nes šioms ligoms nėra specifinių specifinių požymių ir simptomų. Dėl to visų naujagimių patologijos skyrių pacientų, vaikų intensyviosios terapijos skyrių pacientų tyrimas gali padėti greitai nustatyti šias paveldimas ligas.

Pagal TMS metodą acilkarnitinų ir aminorūgščių tyrimo požymiai yra šie:


7. Pakeisti kraujo ir šlapimo - trombocitopenija, neutropenija, anemija, metabolinė acidozė / alkalozės, hipoglikemijos / hiperglikemija, padidėjusi kepenų fermentų ir kreatinkinazės koncentracija, ketonurija.

Genetinės analizės

Merginos, neuropatologas, nukreipė mus į genetiką (ji teigė, kad cerebralinis paralyžius nėra mūsų diagnozė, nors ji vis tiek kreipėsi į sanatoriją). Pasakyk man, kas atsitiko, kiek yra maždaug? Aš vis dar nežinau, į ką mes būsime siunčiami, bet norėčiau sužinoti, kokios sumos pasiruošti, tai nėra bendras kraujo tyrimas...

Mobilioji programa "Happy Mama" 4.7 Bendravimas programoje yra daug patogesnis!

Aš negaliu pasakyti. viskas gali būti. ir viskas yra kitokia

Mes davėme daug dalykų! 4000 rublių kariotipas., TMS 4000 rublių amminokisloty šlapimo 4 kartus (10000 rublių visi), amminokisloty kraujo 4 kartus, taip pat apie 10.000 rublių, 12000 rub Draveto sindromas, laktato daug kartų, ne pigūs Konsultacijų genetika ir Plauktiņš "po- trivia ". Genetinis atranka nėra pigus!

Multi-steroidinis kraujo tyrimas: gyvybiškai svarbių žmogaus hormonų apibrėžimas kokybiškai naujame lygmenyje

Terminas "daug steroidų analizė" reiškia steroidinių hormonų profilio nustatymą dujų chromatografijos-masių spektrometrijos metodu. Šios analizės rezultatų visuma apibūdinama terminu "steroidinis profilis". Iš esmės tai yra dvi vienodos sąlygos.

Multisteroidny analizė - tai vidaus plėtros, iš analizės metodas įteisintas ir sertifikuota kaip "metodas (metodas) matuoti masės koncentracijos steroidinių hormonų kraujo mėginių chromatografija -. Tandem masės spektrometro Mus 08-47 / 376", įregistruota registre Rosstandart numeriu FR.1.31.2015.21875.

Šiuo metu daugelio steroidų analizė nėra įtraukta į Rusijos Federacijos sveikatos ministerijos patvirtintų tyrimų sąrašą ir atliekama kaip mokslinio tyrimo dalis. Pacientai patys turi padengti šios analizės išlaidas. Šiuo metu vyksta darbai siekiant užtikrinti, kad ateityje šias išlaidas padengtų draudimo medicina.

Kiekybinis pagrindinis steroidų hormonų ir serumo metabolitai arba seilių skysčio nuoroda metodas - dujų chromatografija-masių spektrometrija tandeminis (literatūroje šis metodas yra taip pat vadinamas LC-MS / MS) - tam sunkus ir brangus procedūrą. Pagrindinis šio metodo bruožas yra sugebėjimas nustatyti visas deklaruotas analites vienos analizės metu (1 pav.), Todėl vienos analizės požiūriu nustatymo sąnaudos yra beveik mažesnės už alternatyvius imunocheminius metodus.

1 paveikslas. Analizės, nustatytos atliekant vieną analizę pagal metodą

Kodėl biomaterialo pavadinimas "kraujas" pavadintas technika?

Siekiant nedelsiant nustatyti jo skirtumą nuo gerai žinomos analizės "steroidų šlapimo profilio". Reikia pažymėti, kad šlapimo analizės informacija yra visiškai kitokia ir ją reikia aiškinti skirtingai, nes šlapime daugiausia neveikia steroidų formos: sulfatai, gliukuronidai ir hidroksilinti dariniai, kurie jau yra nereikalingi organizmui ir gauti iš jo. Kraujyje nustatomos aktyvių steroidinių hormonų formų koncentracijos, kurios cirkuliuoja į bendrą kraujo tiekimo sistemą, patenka į ląsteles ir nustatomas signalas genomui.

Kokiomis sveikatos sąlygomis nustatomas steroidų kraujo rodinys, kokie gydytojai padeda diagnozuoti steroidų kraujo profilį?

1. Įvairios įgimtos antinksčių žievės funkcijos sutrikimų formos (VDCN). VDCH yra įgimta liga, pasireiškianti pažeidžiant steroidų biosintezę. Tai sukelia vieno iš 5 antinksčių žievės fermentų disfunkcija. Tai gali būti 21a-hidroksilazės (CYP21) arba 11b-hidroksilazės (CYP11B1) trūkumas. Tradicinis naujagimių atranka dėl HBRA imunologiniu tyrimu dažnai duoda klaidingai teigiamų rezultatų nustatant 17-hidroksiprogesteroną. Todėl visais ginčytinais atvejais LC-MS / MS metodu būtina patvirtinti diagnostika [1]. Diagnozė ne klasikinių formų VDKN (NF VDKN) imunocheminių metodų pristato gana sunku, todėl NF VDKN dažnai diagnozuojama naujagimių patikros, tačiau daro jaučiamas vėliau: paaugliams atrodo per anksti plaukų augimą, spuogai; mergaičių, hirsutizmo, menstruacijų disfunkcijos ir reprodukcinių sutrikimų. NF VDKN steroidų profiliui būdingas 21-deoksikortizolio ir 17-OH-progesterono padidėjimas, todėl daugelio steroidų analizė kartu su genetiniais tyrimais yra labai naudinga diagnozuojant šią ligą.

2. Antinksčių nepakankamumas. Tam atliekamas stimuliavimo testas su AKTH ir išmatuojami kortizolio, aldosterono ir 11-deoksikortizolio kiekiai: bazinis, 30 ir 60 minučių po stimuliavimo. Esant pirminiam antinksčių nepakankamumui, aldosteronas nereaguoja į stimuliavimą, o antrinio nepakankamumo atveju jis registruojamas. Kontrolinėje grupėje 11-deoksikortizolio kiekis padidėjo 15-20 kartų reaguojant į AKTH stimuliaciją, o kortizolis padidėjo apie 3 kartus [2].

3. Hipogonadizmas vyrams. Teisingai diagnozuojant hipogonadizmą vyrams reikia nustatyti tikslų bendrą testosterono kiekį (TT), naudojant masių spektrometriją. Atliekant 10 000 savanorių tyrimą nustatyta, kad hipogonadizmą galima diagnozuoti, jei pagal masės spektrometrą TT koncentracija yra mažesnė nei 12,1 nmol / l [3].

4. Vaisių ir moterų pakaitinės terapijos (HRT) kontrolė. Šiai pacientų kategorijai masių spektrometrija yra "auksinis standartas", nes ji leidžia jums pasirinkti teisingą hormono (ar stimuliatoriaus) terapinę dozę, detaliai sekti visų metabolitų reakciją į pakaitinę terapiją ir išvengti trukdžių imunocheminiams metodams [4-6].

5. Labai svarbu stebėti steroidinių hormonų kiekį nėštumo metu ir vienus metus po gimdymo. Daug steroidų analizė suteikia daug tikslesnės informacijos apie androgeninį būklę, palyginti su tradicine DHEA sulfatu.

6. Ginekologija. Virilizuojantys (antrozono gaminantys) antinksčių navikai sukelia androgenų aktyvumą ir sukelia vyresnio sindromo vystymąsi moterims. Nustatyta, kad beveik bet koks hormonų aktyvus kiaušidžių auglys gali sukelti per didelę androgenų ir (arba) estrogenų gamybą, ir turėtų būti diagnozuotas naudojant tandemo masių spektrometrijos metodą [7].

7. Diabetas. Ši liga veikia nervų sistemą ir veikia neurosteroidų koncentraciją. LC-MS / MS leidžia nustatyti neuroaktyvių steroidų koncentraciją, siekiant sukurti naujus požiūrius diabetinės nefropatijos gydymui [8].

8. Sporto medicina. Steroidų profilis sportininkams kraujyje ir seilėse gali suteikti svarbios informacijos apie jų sveikatą, tinkamumą ir kontroliuoti mokymąsi dėl optimalaus apkrovų pasiskirstymo.

Daugelio steroidų analizė apsunkina gyvenimo vietą visam laikui, atsižvelgiant į plačiai paplitusią imunologinio tyrimo metodų ir tradicinių technologijų pranašumų pasipriešinimą. Tačiau šis metodas yra ateitis, jis jau pripažintas geriausiais medicinos mokslo atstovais [9].

Kas yra ALS?

Amiotrofinė šoninė sklerozė yra dažniausia motorinių neuronų liga, kuri yra neurodegeneracinė liga, veikianti motorinius neuronus smegenyse ir nugaros smegenyse.

ALS diagnozė

ALS simptomai gali skirtis nuo vieno asmens iki kito, nes liga turi individualų pobūdį ir progresavimo greitį.

Amiotrofinė šoninė sklerozė yra labai sunku diagnozuoti dėl kelių priežasčių:

  • tai yra reta liga;
  • ankstyvieji simptomai yra gana lengvi, pvz., nepaklusnumas, rankos nepatogumas ar šiek tiek nuovoki kalba, visa tai gali būti dėl visiškai skirtingų priežasčių;
  • liga kiekvienam asmeniui įtakoja įvairiais būdais; nėra aiškių simptomų, kurie aiškiai apibrėžia ALS.

Jei terapeutas turi įtarimą, kad jis arba ji turi ALS pacientą, jis turėtų kreiptis į neurologą. Tada žmogus gali turėti diagnostinių egzaminų seriją, kuri gali būti atliekama tiek ambulatoriškai, tiek stacionariame skyriuje.

Kraujo tyrimas

Tyrimai parodys, ar kraujyje padidėja kreatinkinazės kiekis. Šis fermentas yra gaunamas, kai raumenų audinys sunaikinamas, o jo lygis gali padidėti žmonėms, sergantiems ALS. Tačiau šis rodiklis nėra specifinis ALS požymis, nes tai gali būti kitų ligų rodiklis.

Elektronemromografija (ENMG)

Naudojant ENMG, plonos adatos naudojamos atskirų raumens nervų impulsų registracijai. Įrašymas paprastai atliekamas iš kiekvienos galūnės ir žarnos (ryklės) raumenų. Riebalai, kurie prarado savo inervaciją, yra randami, nes jų elektrinis aktyvumas skiriasi nuo sveikų raumenų veiklos. ENMG rezultatai gali skirtis nuo normos, net jei liga dar neturi įtakos tam tikram raumeniui.

Kai ENMG tikrina impulso greitį palei nervinius pluoštus. Norėdami tai padaryti, nedidelis impulsas praeina per mažą tarpiklį, kuris liečiasi su oda. Tai labai svarbus tyrimo metodas.

Transkranijinė magnetinė stimuliacija (TMS)

Tai naujas metodas, kurį galima atlikti kartu su ENMG. Jis skirtas įvertinti smegenų motorinių neuronų būklę. TMS rezultatai gali padėti diagnozei nustatyti.

Magnetinio rezonanso tomografija (MRT)

MRT gali aptikti nervų sistemos pažeidimus, kuriuos sukelia insultas, Alzheimerio liga, Parkinsono liga, išsėtinė sklerozė, navikai ir nugaros smegenų ir smegenų pažeidimai. MRT neatskleidžia konkrečių ALS pokyčių, nes šios ligos padaryta žala neturi įtakos vaizdams. Šis tyrimo metodas yra naudojamas pašalinti ALS panašių simptomų ligas.

Kiti metodai

Neirologas gali nuspręsti atlikti papildomus tyrimus, pvz., Juosmens punkciją ar raumenų biopsiją, jei kažkas nurodo jų poreikį. Tačiau šie tyrimai ne visada naudojami ALS diagnozei nustatyti.

Tandemo programa
masių spektrometrija (HPLC-MSMS)
klinikine diagnoze

Masės spektrometrija yra klinikinės chemijos plėtros perspektyva: ateitis, kai klinikinės diagnostikos revoliucija leis plačiai naudoti masės spektrometriją.
(Michaelas Ulerichas, Klinikinės chemijos katedra, Georg-August universitetas, Göttingenas, Vokietija)

Remiantis klinikinių biocheminių apžvalgų apžvalga, per pastaruosius 10-12 metų didelio našumo skysčių chromatografijos ir tandeminės masės spektrometrijos (HPLC-MS / MS) naudojimas klinikinėse laboratorijose labai padidėjo. Autoriai pažymi, kad HPLC-MS / MS analizė yra labai geresnė už imunologinius metodus ir klasikinę didelės talpos skysčių chromatografiją (HPLC) mažos molekulinės masės molekulių analizėje ir žymiai aukštesnė nei dujų chromatografijos-masės spektrometrija (GC-MS). Šio metodo populiarumas įprastose klinikinėse analizėse šiuo metu paaiškinamas unikaliais metodo gebėjimais.

    Pagrindiniai HPLC-MS / MS metodo privalumai:

  • Tikslios mažųjų molekulių kiekybinės analizės galimybė;
  • Vienalaikio kelių tikslinių junginių analizė;
  • Unikalus specifiškumas;
  • Greita analizė.
  • Pastaraisiais metais daug dėmesio buvo skirta analizei ir dėl to padidėjo laboratorijų našumas. Galima reikšmingai sumažinti analizės laiką naudojant trumpus analitinius HPLC / MS / MS stulpelius, tuo pačiu metu labai padidinant analizės specifiškumą. Naudojant jonizacijos metodą atmosferos slėgio (API), tandemo trigubo kvadrupolinio masių spektrometro ir pažangios aukštos kokybės skysčių chromatografijos metodu, taip pat tinkamus mėginių paruošimo metodus, HPLC-MS / MS vadovavo šiuolaikiniams klinikinių tyrimų analitiniams metodams.

      Pagrindinės HPLC / MS / MS taikymo sritys klinikinėje medicinoje yra šios:

  • Gauti steroidų (steroidų plokščių), purinų ir pirimidinų bei kitų junginių,
    naujagimių atranka dėl įgimtų medžiagų apykaitos klaidų (vienos analizės metu keliasdešimt ligų nustatymas);
  • Terapinis vaistų stebėjimas - imunosupresantai, perivosudorozhnyh, antiretrovirusiniai vaistai, antikoaguliantai ir bet kuris kitas - nepriklausomai nuo gamintojo rinkinių buvimo. Kiekvienai medžiagai nereikia pirkti brangių rinkinių - galite kurti savo metodus;
  • Klinikinė toksikologija - daugiau nei 500 narkotinių junginių ir jų metabolitų analizė vienoje analizėje, be patvirtinamosios analizės
    proteomika ir metabolomika.
  • Be to, HPLC-MSMS naudojamas urino oligosacharidams, sulfatidams, ilgos grandinės riebalų rūgštims, ilgosios grandies tulžies rūgštims, metilmalono rūgščiai, porfyro tyrimams, pacientų, kurių sutrikusio purio ir pirimidino metabolizmas, skyrimui.

    Skysčių chromatografijos taikymo pavyzdžiai
    kartu su tandemine masės spektrometrija klinikinėse analizėse.

    Naujagimių atranka: pirmasis masinio HPLC-MS / MS vartojimo klinikinėje diagnozėje pavyzdys buvo naujagimių įgimtų medžiagų apykaitos klaidų tikrinimas. Šiuo metu išsivysčiusiose šalyse tai yra įprastas metodas ir apima daugiau nei 30 skirtingų ligų, tarp jų ir acetadios, aminoacidopatijos ir riebalų rūgščių oksidacijos defektų. Ypatingą dėmesį reikia skirti gimdymo defektų tyrimams, kurie gali sukelti rimtų problemų, jei nebus imtasi skubių priemonių (pvz., Padidėjusi širdies ar kepenų liga ar smegenų edema). Naudojant HPLC-MS / MS pranašumą naujagimių atrankai yra galimybė vienu metu analizuoti visas amino rūgštis ir acilkarnitinus greitu, nebrangiu ir labai specifiniu metodu.

    Terapinis vaistų stebėjimas: imunosupresanto sirolimuzo (rapamicino) sukūrimas ir įvedimas siekiant išvengti organų atmetimo po transplantacijos buvo viena iš pagrindinių paskatų HPLC-MS / MS įvedimui į klinikines laboratorijas. Dabartinis HPLC-MS / MS metodas leidžia vienu metu nustatyti takrolimuzą, sirolimuzą, ciklosporiną, everolimuzą ir mikofenoidinę rūgštį.

    HPLC-MS / MS taip pat yra naudojama analizuoti citotoksinius, antiretrovirusinius vaistus, triciklius antidepresantus, prieštraukulinius vaistus ir kitus vaistus, kuriems reikia atskirų dozių.

    HPLC-MSMS metodas leidžia atskirti ir kiekybiškai įvertinti varfarino R- ir S-enantiomerus koncentracijos intervale nuo 0,1 iki 500 ng / ml.

    Narkotinės ir analgetinės medžiagos: HPLC-MS / MS yra plačiai naudojami šių junginių analizei, nes mėginio paruošimo paprastumas ir trumpas analizės laikas. Šiuo metu šis metodas naudojamas klinikinėse laboratorijose, siekiant patikrinti, ar yra daugybė narkotinių medžiagų. Unikalus metodo specifiškumas ir jautrumas leidžia vienu metu analizuoti daugiau kaip 500 skirtingų klasių junginių su minimaliu mėginio paruošimu. Taigi, šlapimo analizės atveju pakanka paprasto mėginio skiedimo 50-100 kartų. Analizuojant plaukus, o ne 100-200 plaukelių grupę, vienintelis plaukas yra pakankamas, kad būtų galima patikimai nustatyti narkotikų vartojimo faktus.

    Endokrinologija ir steroidų analizė. HPLC-MS / MS yra plačiai naudojama daugelyje endokrinologijos laboratorijų steroidų analizei - testosteronui, kortizoliui, alksteronui, progesteronui, estrioliui ir daugeliui kitų.

    Vis daugiau laboratorijų pradeda vartoti HPLC-MS / MS, norėdami nustatyti vitamino D3 ir D2 koncentraciją kraujyje.

    I. Steroidų apibrėžimas (steroidinis profilis).

    Ligoninių ir klinikų laboratorijos šiuo metu gali vienu metu nustatyti keletą steroidų, naudojant HPLC / MS / MS. Tuo pačiu metu nėra reikalo didelės imties apimties, o tai ypač svarbu analizuojant vaikų mėginius.

      Tais atvejais, kai patartina nustatyti kelis (profiliuojančius) steroidus:

  • Įgimta antinksčių hiperplazija (įgimta antinksčių hiperplazija, CAH) yra įgimtas steroidų biosintezės defektas. Tai paveldima ligų grupė, kurią sukelia netinkama antinksčių žievės fermentų veikla, dėl kurios sumažėja kortizolio gamyba. Siekiant patikimos SAN diagnostikos, rekomenduojama nustatyti kortizolį, androstenedioną ir 17-hidroksiprogesteroną. HPLC / MS / MS leidžia tikslų kiekybinį visų trijų steroidų kiekį vienoje analizėje nustatyti 100% tikslumu.
  • Įprastinė naujagimių atranka imunologiniais tyrimais pasižymi dideliu teigiamų ir klaidingai neigiamų rezultatų lygiu. HPLC / MS / MS nustatymas ne tik kortizolio, bet ir aldosterono ir 11-deoksikortizolio, leidžia atskirti pirminį antinksčių žievės nepakankamumą nuo antrinio.
  • HPLC / MS / MS leidžia nustatyti steroidus prostatitui ir lėtinio dubens skausmo sindromui.
  • HPLC-MS / MS leidžia nustatyti steroidų profilį ir nustatyti ankstyvos brendimo priežastis, susijusias su antinksčių žievu mažiems vaikams. Buvo nustatyta, kad testosterono, androstenediono, dehidroepiandrosterono (DHEA) ir jo sulfato koncentracija šiuose vaikuose buvo šiek tiek didesnė nei vyresniems vaikams kontrolinėje grupėje.
  • Analizuojami aktyvių rūkalių, pasyviųjų rūkančiųjų ir nerūkančiųjų kraujo serumai, kurių sudėtyje yra 15 steroidinių hormonų ir skydliaukės hormonų, kad būtų galima ištirti ryšį tarp pacientų, kuriems yra dūmų ir hormonų koncentracijos.
  • HPLC / MS / MS yra naudojama tam tikrų moterų steroidinių hormonų profilaktikai šlapime.
  • Naudojant HPLC / MS / MS, įvertinti neuroaktyvių hormonų koncentraciją siekiant išvengti diabetinės neuropatijos.
  • Ii. Skydliaukės hormonų nustatymas

    Įprastiniai skydliaukės hormonų nustatymo metodai paprastai yra pagrįsti radioimunologiniu tyrimu, kuris yra brangus ir leidžia nustatyti tik T3 ir T4, kurie gali riboti gebėjimą nustatyti ir visiškai kontroliuoti skydliaukės funkcijas.

    • Šiuo metu, naudojant HPLC-MSMS, atliekama vienalaikio tyrimo iš penkių skydliaukės hormonų, įskaitant tiroksiną (T4), 3,3 ', 5-trijotitronino (T3), 3,3', 5'- (rT3), 3, 3'-diiodotironino (3,3'-T2) ir 3,5-diiodotironino (3,5-T2) koncentracija yra 1-500 ng / ml.
    • HPLC / MS / MS metodas taip pat naudojamas analizuojant pacientų hormonų, kuriems atliekama tiroidoektomija, hormonų sudėtį. Nustatyti tiroksino (T4), trijodtironino (T3), laisvo T4 ir stimuliuojančio skydliaukės hormono (TSH) koncentracijos po operacijos koncentracijos. Buvo nustatyta, kad HPLC / MS / MS yra puikus būdas nustatyti ryšį tarp TSH ir skydliaukės hormonų koncentracijos.
    • HPLC / MS / MS metodas buvo naudojamas nustatant tiroksiną (T4) seilėse ir žmogaus serume. Šis metodas pasižymi dideliu atkuriamumu, tikslumu ir aptikimo riba 25 pg / ml. Tyrimai parodė, kad tarp eutiroidinių pacientų ir pacientų, sergančių Graves ligos, diagnostinis ryšys tarp T4 koncentracijų seilėse.

    Šiuo metu HPLC / MS / MS metodas turi jautrumą, specifiškumą ir tikslumą, reikalingą patikimai nustatyti visus steroidus biologiniuose skysčiuose, ir taip didina diagnostinius gebėjimus, ypač nustatant steroidų rinkinius.

    III. 25-oxyvitamin D nustatymas HPLC / MS / MS

    25-hidroksi vitaminas D (25OD) yra pagrindinė vitamino D cirkuliacinė forma ir jo aktyvios formos pirmtakas. (1,25-dioksivitamin D). Atsižvelgiant į ilgo jo pusinės eliminacijos periodą, 25OD nustatymas yra svarbus nustatant vitamino D statusą paciento organizme. Vitaminas D egzistuoja dviem formomis: vitaminu D3 (cholecalciferol) ir vitaminu D2 (ergokalciferolis). Abi formos metabolizuojamos į atitinkamas 25OD formas. Diagnozei labai svarbus yra analizės metodų, kurie gali nustatyti abu vitaminų tipus ir leisti stebėti pacientus su sutrikusiu vitaminu D, prieinamumas. Iki šiol naudojami metodai neleido atskirai nustatyti vitamino D2 ir D3. Be to, esant didelėms vitamino D2 koncentracijoms, nustatomas D3 kiekis yra nepakankamai įvertintas. Kitas trūkumas yra radioaktyviųjų izotopų naudojimas. Naudojant HPLC / MS / MS metodą, buvo galima ne tik išvengti radioaktyviųjų izotopų naudojimo, bet ir atskirų aktyvių vitaminų formų nustatymo.

        Šis metodas taikomas šiems pacientams:

  • Jei įtariate mažą vitamino D kiekį organizme;
  • Jei įtariamas neaiškus toksinis poveikis;
  • Nagrinėjant pacientus, kuriems gydomas nedidelis vitamino D kiekis;
  • HPLC / MS / MS naudojimas leido atskirą abiejų formų nustatymą pacientų stebėjimo metu.
  • Iv. Imunosupresantų nustatymas HPLC / MS / MS

    Po organų transplantacijos visą gyvenimą reikia vartoti imunosupresantus, kad būtų išvengta atmetimo reakcijos. Turėdamas labai siaurą terapinį intervalą ir didelį toksiškumą, imunosupresantai reikalauja individualios dozės, kad būtų pasiektas didžiausias poveikis. Todėl svarbu stebėti pagrindinius imunosupresantus: ciklosporiną A, takrolimuzą, sirolimuzą ir everolimuzą, kad būtų galima kontroliuoti kiekvieno paciento vaisto dozę, priklausomai nuo vaisto koncentracijos kraujyje.

    Imunoanalizė vis dar naudojama sąraše nurodytų vaistų stebėsenai, tačiau šie metodai yra brangūs ir jų specifiškumas, tikslumas ir atkuriamumas yra riboti. Remiantis imunologiniais metodais gautų rezultatų, pacientai mirė netinkamai imunosupresantų dozėmis. Šiuo metu imuninės analizės yra keičiamos klinikinėse laboratorijose, kuriose yra HPLC / MS / MS. Taigi Miuncheno universiteto klinikoje apie 70 mėginių kasdien tiria sirolimuzo ir ciklosporino A kiekį, naudojant HPLC / MS / MS sistemą. Visą prietaiso paruošimą ir valdymą atlieka vienas darbuotojas. Šiuo metodu laboratorija taip pat pereina prie takrolimuzo analizės.

    • Apibūdinamas HPLC / MS / MS naudojimas takrolimuzo, sirolimuzo, askomicino, dimetiksirolimuzo, ciklosporino A ir ciklosporino G įprastam nustatymui kraujyje. Diapazonas nustatomas nuo 1,0 iki 80,0 ng / ml koncentracijos. Dėl ciklosporino 25 - 2000 ng / ml. Per metus laboratorijoje buvo ištirti daugiau kaip 50 000 mėginių.
    • Kadangi buvo nustatyta, kad kartu vartojamas takrolimuzas ir sirolimuzas turi teigiamą terapinį poveikį, buvo parengtas paprastas ir veiksmingas HPLC / MS / MS metodas, skirtas jų atskirai nustatyti kraujyje klinikinėms analizei. Vieno mėginio analizė už visą analitinę kreivę užteko 2,5 minutes tikslumu 2,46% - 7,04% takrolimuzo ir 5,22% - 8,30% sirolimuzo. Apatinė takrolimuzo nustatymo riba yra 0,52 ng / ml, sirolimuzas - 0,47 ng / ml.

    V. Homocisteino nustatymas HPLC / MS / MS

    Homocisteinas yra domimasi širdies ir kraujagyslių ligomis (tromboembolija, širdies liga, aterosklerozė) ir kitomis klinikinėmis sąlygomis (depresija, Alzhaimerio liga, osteoporozė, komplikacijos nėštumo metu ir kt.). Esamos homocisteino tyrimai, įskaitant imunologinius tyrimus, yra brangūs. Analizuojant daugybę mėginių, buvo sukurtas greitas HPLC / MS / MS metodas homocisteino analizei kasdieniniam klinikiniam naudojimui. Jonizacija buvo atlikta elektropelių metodu. Šis metodas yra atkuriamas, labai specifiškas ir tikslus. Metodo privalumai yra taip pat mažos reagentų sąnaudos ir lengvumas mėginių paruošimui. Galima analizuoti 500 arba daugiau mėginių per dieną.

    Išvada

    Reikėtų pažymėti, kad nors šiuo metu naudojami žymiai patobulinti imunologiniai tyrimo metodai, dėl techninių pagrindinių apribojimų šis metodas niekada neturės preciziškumo ir specifiškumo tikslinei medžiagai, palyginti su HPLC-MSMS, ypač esant metabolitams. Tai ne tik lemia mažą ELISA metodo tikslumą ir didelį procentą klaidingai teigiamų ir klaidingai neigiamų rezultatų, bet taip pat neleidžia lyginti skirtinguose klinikiniuose skyriuose gautų rezultatų ELISA metodu. HPLC-MS / MS naudojimas pašalina šį trūkumą, leidžia labai specifiškai, tiksliai ir greitai analizuoti didelį skaičių mėginių, turinčių didelį pasitikėjimą metabolitų buvimu, ir nesant atitinkamų ir endogeninių medžiagų trukdžių pacientų plazmoje ir kraujyje.

    Kaip matyti iš pasaulinės praktikos, nepaisant akivaizdžių didelių instrumentų komplekso sąnaudų, šis tinklas veikia 1-2 metus. Tai visų pirma yra dėl to, kad vienos analizės išlaidos yra mažos, nes tuo pačiu metu atliekama dešimčių ir šimtų jungčių analizė, o nebūtina įsigyti brangių diagnostinių rinkinių. Be to, laboratorija turi galimybę savarankiškai kurti visus būtinus analizės metodus ir nepriklausyti nuo rinkinių gamintojo.

    Pasirinkus tinkamą prietaisų komplekso konfigūraciją

    Yra daug įvairių masės spektrometrijos metodų ir masių spektrometrų tipų, skirtų išspręsti daugybę užduočių - nuo struktūrinių kompleksinių kompleksinių baltymų makromolekulių, sveriančių šimtus tūkstančių Daltonų, iki įprastos didelės apimties mažų molekulių kiekybinės analizės.

    Siekiant sėkmingo užduoties sprendimo, viena iš pagrindinių sąlygų yra tinkamo tipo įrangos pasirinkimas. Nėra universalaus prietaiso, leidžiančio išspręsti visas analitines užduotis. Taigi, prietaisas, skirtas išspręsti mikroorganizmų nustatymo problemą, negali atlikti kiekybinės mažųjų molekulių analizės. Ir atvirkščiai. Faktas yra tai, kad, nepaisant bendro vardo, tai yra visiškai skirtingi įrenginiai, veikiantys skirtingais fiziniais principais. Pirmuoju atveju tai yra skrydžio laiko masės spektrometras su lazerio jonizacijos šaltiniu, MALDI-TOF, o antrojoje - trigubas kvadrupolis su elektrolitų jonizacija, HPLC-MSMS.

    Antrasis svarbiausias parametras yra tinkamos sistemos konfigūracijos pasirinkimas. Yra keletas pagrindinių masės spektrometrijos įrangos gamintojų. Kiekvienas gamintojo įrenginys turi ne tik savo stipriąsias puses, bet ir silpnybes, dėl kurių jie paprastai nori tylėti. Kiekvienas gamintojas gamina savo prietaisų liniją. Vieno analitinio komplekso kaina yra nuo 100 000 iki 1 000 000 arba daugiau dolerių. Optimalaus gamintojo pasirinkimas ir teisinga įrangos konfigūracija ne tik sutaupys reikšmingų finansinių išteklių, bet ir padės efektyviau spręsti užduotį. Deja, yra daug pavyzdžių, kai laboratorija buvo aprūpinta, neatsižvelgdama į šiuos veiksnius. Rezultatas - tuščiosios eigos įranga, švaistomi pinigai.

    Trečias faktorius, lemiantis laboratorijos sėkmę, yra personalas. Masės spektrometruose reikalingas aukštos kvalifikacijos personalas. Deja, nė vienas universitetas Rusijoje neturi šiuolaikinės praktinės masės spektrometrijos kursų, ypač susijusių su klinikinėmis taikomosiomis medžiagomis, ir kiekvienos laboratorijos personalo mokymų uždavinys turi būti išspręstas atskirai. Natūralu, kad po įrenginio paleidimo gamintojo atliktas 2-3 dienų supažindinimo mokymas yra visiškai nepakankamas, kad būtų galima suvokti metodo pagrindus ir įsigyti įgūdžių įrenginyje.

    Ketvirtas veiksnys yra parengtų analizės metodų trūkumas. Kiekviena laboratorija turi savo prioritetus, kuriems reikia kurti savo metodus. Tai gali atlikti asmuo, turintis mažiausiai 2-3 metų patirtį įrenginyje. Gamybos įmonės kartais pateikia vieną ar du bendrus rekomendacinio pobūdžio metodus, bet ne pritaiko juos prie konkrečių laboratorijos užduočių.

    UAB "BioPharmExpert" yra specialistai, turintys ilgametę patirtį dirbdami su įvairiais masių spektrometrais, taip pat kurdami metodus ir rengdami aukštos kokybės analizę. Todėl mes teikiame šias paslaugas:

    1. Optimalaus įrenginio konfigūracijos pasirinkimas konkrečioms kliento užduotims.
    2. Pirkimas, pristatymas ir paleidimas iš pirmaujančių gamintojų tandeminių masių spektrometrų. Palaipsninis personalo mokymas per metus nuo įrenginio paleidimo momento.
    3. Parengtų metodų ir duomenų bazių rinkinys pagrindinėms klinikinėms problemoms spręsti.
    4. Kuriant analizuojamus metodus ir sprendžiant konkrečias kliento užduotis jo laboratorijoje, dalyvaujant jo personalui.
    5. Metodinė parama visuose darbo etapuose.

    Kraujo tyrimas su pirminiu derivatizavimu (TMS-dariniai)

    Dvipusioji dujų chromatografija - skrydžio laiko masės spektrometrija, skirta plazmos analizei su išankstiniu derivatizavimu (TMS-dariniai), rodanti gliukozės 5TMS nustatymą

    Kraujo plazmos metabolitų analizė naudojant dvimatę dujų chromatografijos - skrydžio laiko masės spektrometriją su preliminariu derivatizavimu (TMS-dariniai) parodo 5TMS gliukozės aptikimą su 901 laipsnio sutapimu.

    Ankstesnis Straipsnis

    Hepatito forumas

    Kitas Straipsnis

    Kepenų gydymas kepimo soda