Antiproliferacinis poveikis yra

Galia

Kai žmogaus organizme užsikrečia infekcija, susidaro imuninės reakcijos su sudėtinga ląstelių sąveika. Šių sąveikų reguliatoriai yra specialios baltymų molekulės - citokinai. Iki šiol buvo ištirta daugiau nei 200 skirtingų signalizavimo molekulių. Jų ypatybė yra tai, kad jie patys negali turėti jokio poveikio užsienio antigenams ir tarnauti išimtinai informacijai perduoti iš vienos kameros į kitą. Be citokinų dalyvavimo, normalaus imuninio atsako vystymas neįmanomas. Vienas pagrindinių citokinų yra interferonas.

Yra trijų rūšių interferonas: interferonas-alfa (INF-α), interferono-betta (INF-β), interferono-gama (INF-γ). Visi interferonai turi antivirusinius, imunomoduliacinius, priešvėžinius ir antiproliferacinius efektus. Be bendrų savybių, interferonai turi keletą skirtumų.

INF-α ir INF-β yra labiau panašūs vienas į kitą. Jų genai yra 9 chromosomos. Sukurti abu sukeliančius signalus yra virusai. Joms būdingas ryškus antivirusinis ir priešnavikinis poveikis, kiek mažesniu mastu pasižymi imunomoduliacinėmis savybėmis. Pagrindinės ląstelės, gaminančios INF-α, yra makrofagai, skirti INF-β epitelio ląstelėms, fibroblasts.

INF-γ turi ryškų imunomoduliacinį poveikį, kartu su interleukinu-2 (IL-2) ir naviko nekrozės faktoriumi (TNF ar TNF) yra pagrindinis uždegiminis citokinas, yra imuniteto ląstelinės jungties induktorius. Antivirusinės ir priešnavikinės savybės yra mažiau ryškios nei INF-α ir INF-β. Genas INF-γ yra 12 chromosomos, pagrindinės ląstelės yra T-limfocitai, natūralios arba natūralios žudančiosios ląstelės (NK-ląstelės). Indukcinis gamybos signalas gali būti bet koks antigenas ar kiti citokinai.

Interferonų antivirusinis poveikis yra slopinti virusinės RNR sintezę, slopindamas virusinių apvalkalo baltymų sintezę. Šio poveikio mechanizmas - tai intracellular fermentų, tokių kaip, pavyzdžiui, proteinkinazė arba adenilato sintetazė, įjungimas. Baltymų kinazė naikina baltymų sintezės inicijavimo veiksnį su pranešimo RNR, kuris slopina baltymų sintezę. Adenilato sintetazė - sukelia virusų RNR sunaikinimo medžiagų sintezę.

Imunomoduliuojantis interferonų poveikis yra gebėjimas reguliuoti imuninio atsako ląstelių sąveiką. Interferonai šią funkciją atliks reguliuodami ląstelių jautrumą citokinams ir I tipo pagrindinio histocompatibumo komplekso (GCG1) molekulių ekspresiją ląstelių membranose. GKG1 ekspresijos didinimas viruso užkrėstoms ląstelėms žymiai padidina tikimybę, kad jos bus pripažintos imunokompetentinių ląstelių ir elelenii iš organizmo. Žymiausias imunomoduliacinis savybės turi IFN-, būdamas T-limfocitų pagalbininkas produktas I tipo jį kartu su kitais uždegiminius citokinus aktyvuoti makrofagus, T-citotoksinių limfocitų, natūralių žudikių ląstelių (NK-ląstelių), slopina B-limfocitų aktyvumą aktyvuoja prostaglandiną ir kortikosteroidų sistemas. Visi šie veiksniai sustiprina fagocitines ir citotoksines reakcijas uždegiminio fokusavimo srityje ir padeda veiksmingai pašalinti infekcinį agentą.

Interferonų priešnavikinis poveikis yra susijęs su jų gebėjimu sulėtinti ar slopinti ląstelių kultūros augimą ir aktyvuoti imuninės sistemos priešvėžinius mechanizmus. Ši interferono savybė buvo atrasta seniai ir yra plačiai naudojama gydymo tikslais. Visi priešvėžiniai interferono poveikiai yra suskirstyti į tiesioginius ir netiesioginius. Tiesioginiai yra susiję su gebėjimu tiesiogiai veikti naviko ląsteles, jų augimą ir diferenciaciją. Netiesioginis yra susijęs su padidėjusiu imunokompetentinių ląstelių gebėjimu aptikti ir sunaikinti netipines kūno ląsteles.

Tiesioginis priešvėžinis interferono poveikis:

  • RNR sintezės slopinimas.
  • Baltymų sintezės slopinimas.
  • Neardomųjų ląstelių stimuliavimas brendimui.
  • Padidėja naviko ląstelių membranos antigenų ir hormonų receptorių ekspresija.
  • Laivų formavimo procesų pažeidimas.
  • Onkovirusų neutralizavimas.
  • Nutukimo augimo faktorių slopinimas.

Netiesioginis priešvėžinis interferono poveikis:

  • Imuninės sistemos ląstelių aktyvumo stimuliavimas (makrofagai, NK-ląstelės, T-citotoksiniai limfocitai).
  • Išraiškos stiprinimas ląstelėse, susidedančios iš I klasės molekulių histocompatibility.

Interferonų antiproliferacinis poveikis yra interferonų gebėjimas parodyti citostatikos savybes - slopinti ląstelių augimą, slopindamas RNR ir baltymų sintezę, taip pat slopina augimo faktorius, kurie skatina ląstelių proliferaciją.

Gliukokortikoidai (antiproliferacinis efektas)

Kad antiproliferacinių poveikis gliukokortikoidų, susijusi su ribotu kontakto su monocitų uždegimas ir slopinimo židinio dalijančiose fibroblastų abiejų hormonų, taip pat jų mažėjimą stimuliavimo poveikio histamino, serotonino, kinins, formavimas iš kurių sumažėja-ti steroidų.

Be to, gliukokortikoidai slopina mukopolisacharidų sintezę ir taip riboja vandens ir plazmos baltymų jungimą audiniais, kurie kartu su eksudatu riboja reumatinį uždegimą. Dėl to sumažėja patinimas ir, svarbiausia, reumatinio uždegimo fibrinoidinės fazės, o vėliau hialinozės fazė.

Dėl to sutrinka širdies, miokardo, kraujagyslių ir kt. Vožtuvų struktūros pažeidimai. Geriausias poveikis pasireiškia vartojant gliukokortikoidus kartu su nesteroidiniais vaistais nuo uždegimo.

Gliukokortikoidai taip pat naudojami organizmo trūkumui kompensuoti ir reguliavimo poveikiui sutrikusioms funkcijoms.

Tam, kad būtų išlygintas trūksta gliukokortikoidų hormonų, kai naudojamas kaip pirminės antinksčių nepakankamumo (Adisono ligos, kraujavimas antinksčių žievės sepsio, gimimo traumos, hipoksija), besiskiriantis tuo, nepakankamumas ir gliukozės ir mineralocorticoids, ir vidurinio antinksčių nepakankamumo (hipopituitarizmu, pagumburio slopinimo sistemos - hipofizės - antinksčių žievės dėl ilgo ir dažno gliukokortikoidų), būdinga tik gliukokortikoidų trūkumas.

"Vaikų farmakologija", I.V. Markova

Kortikosteroidų skyrimas kas antrą dieną gali užkirsti kelią ar sumažinti hipotalamino - hipofizio slopinimą ----------------- antinksčių sistemą ir slopinti nespecifinį atsparumą infekcijai. J. Melby (1977) išvardija indikacijas, dėl kurių daugumoje pacientų gliukokortikoidas gali būti skiriamas kas antrą dieną, taip pat ligas, kurioms tai neįmanoma. Galite naudoti gliukokortikoidus kas antrą dieną dėl šių ligų: bronchų...

Skiriant kortikosteroidus tais atvejais, kai nereikalingas nepaprastas gydymas, rekomenduojama atsižvelgti į endogeninių hormonų, esančių antinksčių žievės, sekreciją, dienos ritmą. Gydymo pradžioje dauguma (dažniausiai 2/3) dozės turėtų būti skiriamos ryte, 7 - 8 valandas, o likusieji - po pietų 13 - 14 val. Skirstant paros dozę į tris dozes, jos skiriamos 7, 10...

Natūralus mineralokortikoidas - aldosteronas - gaminamas antinksčių žievės glomerulų zonoje; Šį procesą reguliuoja angiotenzinas II, kuris susidaro po renino. Deoksikortikosterono acetatas (DOXA) ir DOX-trimetilacetatas yra naudojami kaip vaistai. Naudojimo indikacijos. Mineralokortikoidai naudojami žarnyno toksiškumui kartu su infuzijos terapija. Jie taip pat vartojami esant ūminei hipotenzijai, susijusiai su natrio ir vandens praradimu (bet...

Indikacijos ilgalaikiam didelės dozės gliukokortikoidų vartojimui. Jie naudojami kelių savaičių ar net mėnesių, kad autoimuninės hemolizinės anemijos, trombocitopenija purpura, kai nefritas, opinis kolitas, sarkoidozė, ūmine leukemija gydymo, apibendrintas Hodžkino liga, ne reumato kardito, kartais sunkia astma. Daugeliu atvejų terapinis poveikis čia priklauso nuo citolizės reakcijų slopinimo, ypač dėl alerginio gimdymo....

Anabolinių steroidų: methandrostenolone (dianabol, Nerobolum) metilandrostendiol (Methandriol) fenobolin (Durabolin, Nerobolum) retabolil - tai medžiaga, kurią gamina syn darbo vyrų lytinių hormonų (androgenų). Androgenai turi du skirtingus poveikius: androgeninį (t. Y. Antrinių lytinių požymių vystymąsi skatinantį) ir anabolinį poveikį. Anaboliniai steroidai skiriasi nuo irrogeninių struktūrų, o jų androgeninės savybės smarkiai sumažėja (100 ar daugiau kartų)....

Antiproliferaciniai vaistai - narkotikų ir medikamentų sąrašas

Farmakologinio poveikio aprašymas

Antiproliferacinis poveikis yra skirtas užkirsti kelią įvairių ląstelių pernelyg didėjimui. Veiksmų mechanizmas yra skirtingas ir priklauso nuo konkretaus vaisto ir ląstelių, kurioms šis veiksmas nukreiptas, tipo. Visų pirma, šio veiksmo mechanizmas gali būti susijęs su moduliuojančio poveikio tam tikrų onkogenų sintezei teikimu, todėl normalizuojamas neoplastinių ląstelių transformavimas ir naviko augimo slopinimas. Arba veikimo mechanizmas gali būti pagrįstas fibroblastų proliferacijos slopinimu, kurį skatina pagrindinis fibroblastų augimo veiksnys. Narkotikai, turintys antiproliferacinį poveikį, naudojami įvairių onkologinių ligų, prostatos adenomos ir įvairių lėtinių odos ligų (pvz., Psoriazės) gydymui ir prevencijai.

Narkotikų paieška

Preparatai su farmakologiniu veiksmu "Antiproliferacinis"

  • A
  • Avonex (liofilizatas injekciniam tirpalui paruošti)
  • Avonex (tirpalas į raumenis)
  • Adenostop (koncentratas geriamojo tirpalo ruošimui)
  • Alteviras (injekcinis tirpalas)
  • Alfaferonas (injekcinis tirpalas)
  • Arava (peroralinės tabletės)
  • B
  • Belodermas (kremas išoriniam naudojimui)
  • Belodermas (tepalas išoriniam naudojimui)
  • R
  • Genferon (tiesiosios žarnos žvakės)
  • Genferon Light (purškalas nosies)
  • D
  • Dilatrend (peroralinės tabletės)
  • L
  • Leflunomidas (miltelių pavidalo medžiaga)
  • Leflunomidas (geriamosios tabletės)
  • F
  • Permixon (kapsulė)
  • R
  • Realdironas (liofilizatas tirpalo paruošimui po oda)
  • Ronbetal (tirpalas po oda)
  • T
  • Tadenanas (kapsulė)
  • Tykveol (aliejus peroraliniam vartojimui)
  • Tykveol (tiesiosios žarnos žvakės)
  • Tykveol (kapsulė)

Dėmesio! Šiame vaistų vadove pateikta informacija skirta medicinos specialistams ir neturėtų būti savaiminio gydymo pagrindas. Narkotikų aprašymai pateikiami supažindinant su vaistą ir nėra skirti gydymui paskirti be gydytojo dalyvavimo. Yra kontraindikacijų. Pacientams reikia ekspertų patarimų!

Jei Jus sudomino bet kurie kiti antiproliferaciniai preparatai ir preparatai, jų aprašymai ir naudojimo instrukcijos, sinonimai ir analogai, informacija apie išsiskyrimo sudėtį ir formą, vartojimo indikacijas ir šalutinius poveikius, naudojimo būdus, dozes ir kontraindikacijas, vaikų vaistų sąrašas, naujagimiai ir nėščios moterys, vaistų kaina ir apžvalgos arba turite kitų klausimų ir pasiūlymų - parašykite mums, mes tikrai stengsimės jums padėti.

antiproliferacinis

Antiproliferacinis poveikis yra skirtas užkirsti kelią įvairių ląstelių pernelyg didėjimui.

Veiksmų mechanizmas yra skirtingas ir priklauso nuo konkretaus vaisto ir ląstelių, kurioms šis veiksmas nukreiptas, tipo. Visų pirma, šio veiksmo mechanizmas gali būti susijęs su moduliuojančio poveikio tam tikrų onkogenų sintezei teikimu, todėl normalizuojamas neoplastinių ląstelių transformavimas ir naviko augimo slopinimas. Arba veikimo mechanizmas gali būti pagrįstas fibroblastų proliferacijos slopinimu, kurį skatina pagrindinis fibroblastų augimo veiksnys.

Narkotikai, turintys antiproliferacinį poveikį, naudojami įvairių onkologinių ligų, prostatos adenomos ir įvairių lėtinių odos ligų (pvz., Psoriazės) gydymui ir prevencijai.

Antiproliferacinis agentas

Išradimas susijęs su farmacijos pramone, ypač su natūralios kilmės priemonėmis, su antiproliferaciniu aktyvumu. Antiproliferacinio aktyvumo agentas yra Toxocara canis baltymo ekstraktas, gaunamas ekstrahuojant helminto homogenatą T. Canis fosfato ir druskos buferinį tirpalą, kurio pH yra 7,2, santykiu 1:10 36-48 valandomis 4 ° C temperatūroje, centrifuguojant. Aukščiau išvardyta priemonė turi ryškų antiproliferacinį aktyvumą. 1 AG f-ly, 1 tab., 2 ex.

Išradimas susijęs su medicinos ir veterinarijos sritimi, ypač su naujais natūralios kilmės būdais, turinčiais antiproliferacinį poveikį.

Šiuolaikinė medicina turi gana plačią narkotikų arsenalą navikų chemoterapijai. Daugumą chemoterapinių agentų atstovauja alkiluojančių antineoplastinių vaistų grupės, antimetabolitai, priešvėžiniai antibiotikai, priešvėžiniai hormoniniai vaistai, imunomoduliatoriai ir kai kurie kiti veikimo mechanizmai. Dauguma šių priešvėžinių vaistų yra labai toksiški, todėl chemoterapijos schema ir trukmė yra parenkamos atsižvelgiant į šalutinių poveikių pasireiškimus, kurie bendrai veikia gydymo veiksmingumą.

Yra žinomi augalinės kilmės natūralūs priešnavikiniai vaistai (Vinca rožinės alkaloidai (vinblastinas, vinkristinas), kukmedžio alkaloidai (taksanai) (paklitakselis, docetakselis); )) ir bakterinės kilmės (rubromicinas ir kt.), kurių naudojimas ribotas ir dėl didelio toksiškumo ir siauro terapinio poveikio spektro (kai kurių tipų ai naviko, pageidautina su exophytic augimas).

Todėl reikalingi nauji, labai veiksmingi natūralios kilmės priešvėžiniai vaistiniai preparatai, kurie turėtų platų veiksmų spektrą ir būtų mažiau toksiški.

Helmintai - bendras parazitinių kirminų, kurie gyvena žmonėms, kitiems gyvūnams ir augalams, kurie sukelia helminto infekcijas, pavadinimas.

Helmintai - tai kaspinuočių, cestočių, šikšnosparnių arba trematodų (abiejų grupių priklauso plokščiagyslių) ir apvaliųjų kirmėlių ar nematodų atstovai.

Pastarieji yra toksokarai (ypač Toxocara canis). T. canis yra nematodas, parazitinis mėsėdžių žarnyne, pvz., Šunys; invazinė liga, žinoma kaip toksikariozė.

Parazitizmo metu helmintai gamina ir išskiria įvairius medžiagų apykaitos produktus. Seksualinės išskyros helmintų atliekos yra nenatūralios medžiagos organizmo šeimininkui jos fiziologinių procesų metu.

Yra žinoma, kad invazijų sukėlėjai gali turėti daugialypį poveikį daugelio įvairių etiologinių ligų, tarp jų ir piktybinių (pvz., Vasilev S. et al., 2015), eigą (visų pirma, yra pranešimų, kad infekcija su nematodais Trichinella spiralis ( po trichineliozės dauginimuisi) sukelia piktybinių ląstelių augimo slopinimą ir padidina gyvulių išlikimą po B-16 melanomos ląstelių in vivo inokuliacijos (Molinari JA, Ebersole JL, 1977; Pocock D., Meerovitch E., 1982; Kang YL et al., 2013 ). Taip pat yra duomenų apie T. spira metabolizmo produktus liz su inertiniu poveikiu naviko ląstelių augimui ir išgyvenimui in vitro (Vasilev S. et al., 2015; Wang X. L. et al., 2009; Wang X. L. et al., 2013).

T. canis priešgrybelinio aktyvumo ar šių helmintų medžiagų apykaitos produktų tyrimai dar nebuvo atlikti.

Išradimo tikslas yra gauti baltymų ekstraktus iš audinių T. canis, įvertinti jų antiproliferacinį poveikį skirtingų linijų naviko ląstelių modeliams ir užtikrinti jų galimą panaudojimą ateityje kaip veiksmingą priešvėžinį agentą.

Išradimo esmė yra tai, kad agentas, turintis antiproliferacinį aktyvumą, yra proteino ekstraktas iš helmintų, ypač Toxocara canis ekstraktas. Reikėtų pažymėti, kad sąlygos gauti ekstraktą iš helminto homogenato, įskaitant T. canis, priklauso nuo naudojamos biologinės medžiagos, o esminiai baltymų ekstraktų gavimo ypatumai yra ekstrahavimas fosfatinio druskos buferiu, kurio pH = 7.2.

Ekstraktas turi ryškų antiproliferacinį ir citostatinį poveikį žmogaus navikinių ląstelių modeliams in vitro. Kaip minėta pirmiau, toksokarinio ekstrakto in vitro anksčiau netirta žmogaus navikinių ląstelių modeliuose.

Dėl natūralios siūlomo antiproliferacinio agento kilmės gali būti mažiau toksiškas, jei yra didelis priešnavikinis plazmos spektro veiksmingumas.

Ypatingos veiklos pavyzdžiai

1 pavyzdys. Baltojo ekstrakto T. canis paruošimas.

Kaip priemone, tariamai su antiproliferacine veikla, naudojamas brandintas T. canis baltyminis ekstraktas, iš anksto išvalytas iš mažo molekulinio svorio junginių.

Kruopščiai nuplaunama distiliuotu vandeniu, po to fiziologiniu tirpalu šviežiai užšaldytus lytiniu būdu subrendusius kirminus. Toxocara canis buvo žirklės šlifavimas, homogenizavimas porcelianiniame mišinyje, dedamas į indą su ledu. Vykstant homogenizavimui, gautas biomaterialas daug kartų užšaldomas ir atšildomas (3-5 kartus) su tuo pačiu šlifavimu, kad visiškai sugadintų žaliavos struktūrą, kad gautų homogeninę homogeninę masę. Kaip iš baltymų ekstrahavimo iš gauto T. canis homogenato buvo naudojamas fosfato-fiziologinio tirpalo buferinis tirpalas, kurio pH 7,2, kuris buvo paruoštas pagal receptą (natrio chloridas, 8,5 g, diizuoto natrio fosfato, 1,15 g, monofosforo rūgšties kalio, 0, 2 g 1 l distiliuoto vandens) santykiu 1:10. Ekstrahavimas buvo atliktas esant šaldomoms sąlygoms + 4 ° C temperatūroje 48 h, nuolat maišant magnetine maišykle. Po ekstrahavimo laikas, gautas biomaterialas centrifuguojamas 15 000 apsisukimų per minutę 20 minučių Optima TLX šaldytu centrifugoje (centrifugas ant stalo, kurį kontroliuoja mikroprocesorius Becman Coulter Herneshal, S.A.). T. canis baltyminis ekstraktas, gautas po centrifugavimo, buvo išlaisvintas iš mažos molekulinės masės baltymų dializuojant prieš fosfatų ir druskos buferinį tirpalą, praskiestą distiliuotu vandeniu santykiu 1:10.

Gautas baltyminis ekstraktas buvo laikomas -20 ° C temperatūroje. Naudojant poliakrilamido gelio elektroforezę nustatyta, kad T. canis baltyminiame ekstrakte yra daugiau kaip 20 skirtingo elektroforezinio mobilumo ir molekulinės masės baltymų.

2 pavyzdys. T. canis baltymo ekstrakto poveikio žmogaus krūties vėžio ląstelių (MCF-7) ir žmogaus storosios žarnos (Caco-2) kultūrų poveikiui vertinimas priklauso nuo ekstrakto koncentracijos.

Šio eksperimento tikslas buvo įvertinti baltymų ekstrakto T. canis poveikį dviejų lynelių žmogaus naviko ląstelių proliferacijai.

Medžiagos ir metodai

Tikslinės ląstelės. Šiame darbe buvo naudojamos dvi epitelio ląstelių linijos: MCF-7 (žmogaus krūties adenokarcinoma) ir Caco-2 (žmogaus gaubtinės žarnos adenokarcinoma). Ne eksperimento ląstelės buvo laikomos skystame azote. Prieš atlikdami tyrimus, ampulės su ląstelėmis atšildomos ir kultivuojamos standartinėmis metodikomis DMEM GlutaMAX augimo terpėje (Gibco) su kultūros buteliukais (CORNING, Flask, 25 cm2, JAV), pridėjus 10% FBS ir antibiotikų / antimikotų (Gibco, × 100) didelės drėgmės sąlygos2-inkubatorius (New Brunswick, Galaxy 170R) esant T = 37 ° C 5% CO atmosferoje2.

Ištirtas baltymų ekstraktas. Ištirtas baltyminis ekstraktas T. canis (paruošimui, žr. 1 pavyzdį) yra ekstraktas fosfatiniame buferyje, ne sterilus. Baltymo koncentracija pradiniame tirpale buvo 10,9 mg / ml. Prieš pradedant tyrimą tirpalas buvo laikomas -70 ° C temperatūroje.

Prieš operaciją mėgintuvėlis su baltymų ekstraktu atšildytas kambario temperatūroje. Bandomajame in vitro bandyme baltymų ekstraktas buvo tiriamas toliau nurodytomis baltymų koncentracijomis: 12,5, 25, 50, 100, 250, 500, 1 ir 2 mg / ml. Skiedimui paruošti buvo naudojama DMEM GlutaMAX augimo terpė (DGIBCO) su 2% FBS ir antibiotikais.

Prieš eksperimentas buvo paruošti darbinį tirpalą su 2 mg / ml koncentracijos, po sterilizacijos per miliporų aplanką-antgalio (0,22 mkm) buvo ruošiami skiedžiant T. canis ekstrakto: 1, 500, 250, 100, 50, 25 ir 12,5 μg / ml, naudojant augimo terpę DMEM GlutaMAX (DGIBCO) su 2% FBS ir antibiotikais.

Eksperimentui MCF-7 ir Caco-2 ląstelės buvo inkubuojamos pagal standartinę procedūrą, kad gautų subkonflutizuotą monolitą. Aktyvioje augimo stadijoje ląstelių monosluoksnis buvo disperguojamas tripsinu ir inertiniu tirpalu, o gautos ląstelės buvo resuspenduojamos DMEM GlutaMAX augimo terpėje (Gibco) su 10% FBS ir standartine koncentracija antibiotikais. Švelniai paruošta ląstelių suspensija buvo sėjama į 24 šulinėlių plokštes (SARSTEDT, Vokietija) 35 × 10 3 ląstelių vienoje šulinėlėje MCF-7 ląstelėms ir 30 × 10 3 ląstelių vienam šuliniui Caco-2 ląstelėms. Po to plokštės buvo dedamos į CO2-inkubatoriumi 3 valandas, kol ląstelės išsiplės. Tada iš šulinėlių buvo pašalinta terpė su nesuderintomis ląstelėmis, o eksperimentinėse šuliniuose buvo pridedama auginimo terpė, kurioje buvo bandomos medžiagos koncentracijos (keturios pakartojimai kiekvienai bandymo koncentracijai). Kontroliu buvo palikta keturių šulinėlių ląstelių, kurios buvo auginamos visiškai augimo terpėje su 2% FBS be bandomosios medžiagos. Galutinis augimo terpės tūris kontrolinėje ir eksperimentinėje grupėje yra 500 μl viename šulinyje.

Eksperimento metu dienos šviesos optinis ląstelių stebėjimas buvo atliekamas naudojant invertuotą "Olympus" CK 40 mikroskopą (Japonija), kuriame eksperimentinio šulinio ląstelių morfologijos pokyčių buvimas arba nebuvimas buvo didesnis nei kontrolinis. Veislinių ląstelių proliferacinis atsakas į tiriamo T. canis ekstrakto poveikį buvo įvertintas susiformuoto monolitinio tankio ir gyvybingumo po 96 valandų inkubuojant ląsteles esant tiriamam ekstraktui.

Ląstelių gyvybingumas nustatytas taikant standartinę ląstelių skaičiavimo metodiką Goryajevo kameroje, iš anksto dažant ląstelių suspensiją su trinamo mėlyno tirpalu. Tuo tikslu monoliuotė buvo išsklaidyta tripsino ir versseno tirpalu, ląstelės buvo suspensijos auginimo terpėje, o paruoštą ląstelių suspensiją dažyti su 0,4% Trypan Blue tirpalu (SIGMA). Po to ląstelės buvo skaičiuojamos Goryajevo kameroje. Norėdami tai padaryti, kiekviename griovyje buvo skaičiuojamas bendras (bendras) ląstelių skaičius ir dažytų (negyvybingų) ląstelių skaičius.

% gyvybingų ląstelių (Ngerai) apskaičiuojamas pagal formulę

kur nt - bendras (bendras) ląstelių skaičius šulinyje;

Napie - nudažytų (negyvybingų) ląstelių skaičius šulinyje.

Ištirto T. canis ekstrakto poveikis auglio ląstelių MCF-7 ir Caco-2 proliferaciniam aktyvumui buvo įvertintas po 96 val., Lyginant bendrą ląstelių skaičių eksperimentiniuose šuliniuose, palyginti su kontroline.

Eksperimento bandomosios ekstrakto T. canis efektą koncentracijos nurodytų ant epitelio kultūrose motinos naviko ląstelių (MCF-7) ir žmogaus storosios žarnos įvertinant metu (Caco-2) buvo atliekamas kasdien vizualiai kontroliuoti augimo ir morfologijos augančių kolonijų ląstelių pobūdžio. Po 24 ir 48 valandų visuose eksperimentiniuose šuliniuose su MCF-7 ir Caco-2 ląstelėmis kolonijų tankis yra panašus į kontrolę. Jokių morfologinių pokyčių nenustatyta. Detritus visiškai nebuvo.

Po 72 valandų MCF-7 ir Caco-2 ląstelėse pastebimas didelis augimas 2 mg / ml koncentracijos atžvilgiu. Buvo pažymėta, kad eksperimentiniuose šuliniuose, esant 2 mg / ml, kolonijų dydis buvo mažesnis nei kontrolinėje grupėje; taip pat regos lauke pastebimai sumažėjo mitozinių skilvelių ląstelių skaičius ir morfologiniai pokyčiai nebuvo pastebėti. MCF-7 ir Caco-2 ląstelių šuliniuose, esant 1 ir 500 μg / ml, pastebėtas nedidelis augimo atsilikimas, palyginti su kontroline. Eksperimentuotuose šuliniuose, kurių koncentracija buvo 12,5, 25, 50 ir 250 μg / ml, skirtumai nebuvo lyginant su kontroline K grupe.

Po 96 val. Auginimo MCF-7 ir Caco-2 ląstelėse, esant 2, 1 ir 500 μg / ml koncentracijai, regos lauke pastebėta žymiai mažiau proliferuojamų kolonijų, o mažesnio ląstelių skaičiaus, palyginti su kontroline grupe, skaičius. MCF-7 ląstelėse morfologiniai pokyčiai buvo pastebėti tik esant maksimaliai 2 mg / ml koncentracijai. Šioje eksperimentinėje grupėje buvo pastebėtos atskiros kolonijos, kuriose buvo pastebėti ląstelės be aiškių ir ryškių kontūrų, kurių charakteristika nebūna. Sumažėja mitozinių skirstomųjų ląstelių skaičius matymo lauke. Tokiu atveju aplinkoje nėra dirvožemio.

Pasibaigus eksperimentui, po 96 val. Ląstelės buvo tripsinizuotos, gautą ląstelių suspensiją dažyti 0,4% tripanso mėlynojo tirpalo, o ląstelių skaičius buvo skaičiuojamas Goryajevo kameroje. Ląstelių skaičiavimo rezultatai pateikti 1 lentelėje.

Remiantis 1 lentelėje pateiktais duomenimis, tiriamas T. canis ekstraktas po 96 h inkubavimo reikšmingai nekeičia gyvybingų Caco-2 ląstelių skaičiaus. Taigi, esant 2, 1 ir 500 μg / ml koncentracijai, gyvybingų žmogaus gaubtinės žarnos ląstelių skaičius buvo 90,0, 88,5 ir 88%, kuris yra panašus į ląstelių kontrolinę grupę, kur gyvybingumas yra 96%. Tuo pačiu metu, esant tokioms pačioms koncentracijos vertėms, palyginti su kontroline grupe, buvo pastebėtas reikšmingas bendras ląstelių skaičiaus sumažėjimas. Taigi bendras 96 C kulkšnies kontrolinių grupių Caco-2 ląstelių skaičius buvo 116,7 × 10 3 ląstelių per šulinėlį, o 500, 1 ir 2 mg / ml - 72,0 × 10 3, 63,3 × 10 3 ir 65,9 × 10 3 ląstelės / šulinys. Esant ekstrakto koncentracijai nuo 12,5 iki 250 μg / ml, bendras ląstelių skaičius yra panašus į kontrolinę grupę ir svyruoja nuo 94,0 × 10 3 iki 106,0 × 10 3 ląstelių per šulinėlį. Remiantis tuo galima daryti išvadą, kad didelė T. canis ekstrakto koncentracija nuo 500 iki 2 mg / ml slopina Caco-2 naviko ląstelių proliferacinį aktyvumą.

Palyginus gautus rezultatus (1 lentelė) apie T. canis ekstrakto poveikį žmogaus krūties ir žmogaus gaubtinės žarnos navikų ląstelių kultūrai, galima daryti prielaidą, kad MCF-7 ląstelės yra jautresnės neigiamam bandomosios medžiagos poveikiui. Taigi iš 1 lentelės duomenų matyti, kad gyvybingų MCF-7 ląstelių skaičius palaipsniui sumažėjo nuo 95,2%, kai minimali dozė buvo 12,5-79,5%, didžiausia vertė buvo 2 mg / ml, palyginti su kontroline 96,8 % Šiek tiek slopina bandomosios ekstrakto proliferacinio aktyvumo MCF-7 ląstelių pasirodė jau 50 ug / ml, jeigu bendras ląstelių skaičius sudarė 151,9 × kovo 10 d ląstelių / duobutėje koncentracijos, lyginant su atskaitos vertės 181,3 × kovo 10 ląstelių / skylė Koncentracija padidėjo nuo 100 μg / ml ir didesnė, inhibitorinis ekstrakto poveikis padidėjo proporcingai koncentracijai ir pasiekė maksimalias reikšmes 2 mg / ml, kai bendras ląstelių skaičius sumažėjo tris kartus, palyginti su kontroliniu, ir buvo 60,0 × 10 3 ląstelių per šulinėlį.

Remdamiesi šiame darbe pateiktais rezultatais, galime padaryti išvadą apie tai.

1. Ištirtas T. canis ekstraktas turi didžiulį antiproliferacinį poveikį MCF-7 ląstelėms 100, 250, 500, 1 ir 2 mg / ml koncentracijose, kuris pasireiškia 96 h inkubavimo metu.

2. Ekstrakto poveikis MCF-7 ląstelėms priklauso nuo dozės.

3. T. canis ekstrakto slopinantis poveikis Caco-2 ląstelių kultūros proliferaciniam aktyvumui pasireiškia mažesne apimtimi ir didesnėmis koncentracijomis - 500, 1 ir 2 mg / ml.

4. MCF-7 ląstelių kultūra yra jautresnė T. canis ekstrakto antiproliferaciniam poveikiui, palyginti su Caco-2 ląstelėmis in vitro modeliu po 96 val. Kultūros.

1. Kang Y.J., Jo Jo, Cho M.K. et al. Iš B16-F10 melanomos ląstelių infekcijos Thrichinella spiralis // Vet. Parazitolis. - 2013. - V. 196 (1-2). - P. 106-113.

2. Molinari, J.A., Ebersole, J.L. Ilgalaikio Trichinella spiralis infekcijos antinavikinis poveikis B-16 melanomai // Int. Arka Alergijos taikymas Imunol. - 1977. - V. 55 (1-4). 444-448 p.

3. Pocock D., Meerovitch E. Trichineliozės anti-neoplastinis poveikis sinerginiame pelių modelyje // Parazitologija. - 1982. - V. 84 (Pt 3). - 463-473 psl.

4. Vasilev S., Ilic N., Gruden-Movsesijan A. ir kt. Nekrozė ir apoptozė Trichinella spiralis tarpiniuose navikų reduktavimuose // Cent. Eur. J. Immunologija. - 2015 m. - V. 40 (1). - 42-53 psl.

5. Wang X.L., Fu B.Q., Yang S.J. et al. Trichinella spiralis - galimas priešnavikinis agentas // Vet. Parazitolis. - 2009. - V. 159 (3-4). - 249-252 psl.

6. Wang X.L., Liu M.Y., Sun S.M. et al. Trichinella spiralis gaminamas priešvėžinis baltymas sukelia apoptozę žmogaus hepatomos H7402 ląstelėse // Vet. Parazitolis. - 2013. - V. 194 (2-4). - 186-188 p.

1. agentas, turi antiproliferaciniu aktyvumu, kuris yra baltymas, ekstraktas: Toxocara canis, gaunamas ekstrahuojant gomogentata HELMINTAI T. canis fosfato-buferio druskų tirpalu esant pH 7,2 1:10 už 36-48 valandų santykis, esant 4 ° C, ir centrifugavimas.

2. Įrankis pagal 1 punktą, b e s i s k i r i a n t i s tuo, kad jis turi antiproliferacinį aktyvumą žmogaus navikinių ląstelių modeliuose in vitro.

Antiproliferacinis poveikis yra

Kai kurios funkcijos yra antiproliferacinis interferonų poveikis. Dauguma interferono antiinfekcinio aktyvumo komponentų vaidina savo priešvėžinį poveikį.

Cituojami padidėjo sintezės Mx-baltymai, yra inhibitoriai mRNR transkripcijos fermentų 2'-5'-oligoadenylate sintetazės sistema, slopinimui, reikalingą korinio baltymų, triptofano išeikvoti ląstelės viduje parduotuvių sintezės vertimą, vedantį į sutrikus baltymų sintezę ląstelėje, yra labai svarbios, kuris slopina proliferaciją, įskaitant priešvėžinį, interferoninį poveikį.

Reikšmingumo lygmuo keičia 2'-5 'sintetazės antiproliferaciniu veiksmų IFN-a įteisintų klinikinių stebėjimų: rodo koreliacijos laipsnis didėjant lygio fermento terapija yra veiksmingas pacientams, sergantiems žarnyno karcinoidinį ir limfomos.

Ne mažiau reikšmingas antiproliferacinis interferono veikimas yra kitas mechanizmas. Signalas, perduodamas ląstelės branduoliui, jungiantis interferoną prie interferono receptoriaus, sumažina proto-onkogenų ekspresiją, ypač c-tus ir c-fos, dalyvaujančius reguliuojant ląstelių augimą.

Šių protonukonų veiklos slopinimas veda prie ląstelės ciklo blokados, ląstelių kaupimosi G0 fazėje, todėl proliferacija sulėtins arba net sustos, nes dauguma ląstelių patiria apoptozę. Šis procesas yra grįžtamasis ir praėjus tam tikram laikui po interferono pašalinimo, ląstelių proliferacija gali atsigauti tuo pačiu greičiu, o onkogenų ekspresija, slopinta interferono buvimo metu, kai ji pašalinama iš organizmo, taip pat gali atsigauti tuo pačiu lygiu.

Panašiai interferonų poveikis daugeliu atvejų nesukelia negrįžtamų ląstelių procesų, kurių genotipas pakeičiamas įjungus viruso genomą į ląstelės DNR. Ilgalaikis interferono vartojimas šiais atvejais gali atkurti normalų ląstelių fenotipą, tačiau interferono veikimo nutraukimas vėl sukelia naviko išsivystymą.

Angiogenezės, kraujagyslių augimo ir neoplazmos, kuri atlieka svarbų vaidmenį naviko augimo ir metastazių, slopinimas yra svarbus antiproliferacinis, ypač priešvėžinis, interferonų poveikis. Daug tiriantys terapinį veikimo mechanizmas IFN-A esant haemangiomatosis parodė, kad interferonai slopina endotelio ląstelių proliferaciją ir lygiųjų raumenų ląstelių, slopina fibroblastų augimo faktoriaus ir angiogenin (augimo faktoriaus ir kraujagyslių navikai), sumažinti kolageno gamybą.

Buvo parodyta, kad IL-12, turintis ryškų antiangiogeninį poveikį, sustiprina IFN-y ir jo efekto baltymo p10 susidarymą.

Apie sveikų donorų ląstelių kultūras ir pacientus, sergančius ūmine leukemija, buvo įrodyta, kad IFN-a žymiai slopina telomerazės aktyvumą, fermentą, reguliuojantį telomerų ilgį, būtiną ląstelių dalijimui. Yra pakartotinai patvirtinti įrodymai, kad IFN-y didina FAS antigeno ir kaspazės 3 išraišką ir taip skatina apoptozę kaulų čiulpų (CD34 +) progenoriuose.

Yra įrodymų, kad IFN-a veikia panašiu būdu, o jos apoptozinio poveikio poveikis sustiprina dėl jo atsiradusios antiapoptozės Bax molekulės suskaidymo. IFN-a taip pat padidina naviko nekrozės faktoriaus išsiskyrimą į kraują, kuris yra skirtas auglio ląstelių skilimui.

Taigi, remiantis turimais duomenimis, akivaizdu, kad interferonai turi antiproliferacinius, įskaitant priešvėžinius, veiksmus, įgyvendinami keliais, dažnai tarpusavyje susijusiais būdais. Interferonų priešnavikinio poveikio atveju svarbūs yra ir aprašyti tiesioginio poveikio augliams ir netiesioginių antimikrobinių mechanizmų, susijusių su makrofagų aktyvumo padidėjimu, T-ląstelių aktyvacija, natūraliais žudikiais ir antikūnų gamybos padidėjimu, aprašymai.

Antiproliferacinis poveikis yra

Epidemiologijos ir mikrobiologijos institutas. N.F. Gamalei RAMS, Maskva

Antiproliferacinis poveikis

Labai jautrus naviko ląstelių AP poveikiui, pasižyminčiam nuolatiniu nekontroliuojamu augimu, todėl AP poveikis suteikė vilties dėl IFN priešvėžinio aktyvumo. Daugybė šimtų mokslininkų, dirbančių šios problemos tyrime, dažnai derindami šias dvi sąvokas, kurios yra kliniškai neteisingos.

Naudojant IFN didelėmis dozėmis (> 1 mln. TV), AP poveikis išreiškiamas daugiausia citopenija. Kraujo tyrimo sistemos ląstelės yra labai jautrios IFN. Tai slopina augimą ir gebėjimą kolonizuoti kaulų čiulpuose ir blužnyje. Taip pat slopinamas mitogeninių stimuliuotų limfocitų dauginimasis. Paprastai limfų serija yra jautresnė IFN nei mieloidinė. Mažiausiai jautrūs interferono eritropoezės veikimui.

Tačiau, IFN naudojamas aukštos paros dozių (3-15 TV), sukelia cytoreduction (sumažinti cirkuliuojančių leukocitų auglio skaičių) iš 9 d vidutiniškai 97,4x10 4,2x10 9 / l mažėjant dydį blužnies [28] pacientams, lėtinė mieloidinė leukemija. Šis poveikis priklausė nuo vartojamų vaisto dozių (tai buvo pasiekta dėl AP poveikio), tačiau buvo reikalingos papildomos priemonės, kad būtų pasiektas priešvėžinis poveikis ir gydymas, įskaitant kaulų čiulpų transplantaciją.

AP poveikis yra grįžtamas. Po sustabdymo IFN hematopoiesis yra visiškai atkurtas. Augimo ląstelių augimas taip pat atnaujinamas. Norint išlaikyti AP poveikį organizmui, reikia nuolat vartoti dideles IFN dozes.

AP poveikis yra tikrai susijęs su aktyvavimo 2 ', 5'-oligo (A), sintetazę, kaip įvairių kultūrų persidengia, Layer 2', 5'-oligoadenylates į citoplazmą ir slopinimo proliferacijos laipsnį. Šis santykis dar nėra aiškus. Vienas dalykas yra neabejotina, kad AB ir AP vystymosi molekuliniai mechanizmai, esantys vėlesniuose etapuose, yra skirtingi. Pavyzdžiui, choleros toksinas, keičiantis citoplazminės membranos fizikinės ir cheminės būklės ir cAMP lygmens, slopina AV būseną, bet ne AP poveikį [29]. Panašus veiksmas turi oubainą, puromiciną ir cikloheksimidą tam tikrose koncentracijose.

Korpuso odos raumenų, mezenchiminių ir epitelio audinių ląstelės paprastai yra atsparios IFN veikimui. Labiausiai jautrus modelis, naudojamas AP efekto matavimui, laikomas transformuoto Daudi linijos B limfocitu, išskirtu iš Burkitto limfomos sergančių pacientų. Atlikus retrospektyvią analizę, galime daryti išvadą, kad aktyvumas yra anti-proliferacinis potencialas IFN-α. Dažniausiai jis yra 10-20 kartų efektyvesnis už IFN-α. IFN- ir IFN aktyvumas priklauso nuo ląstelių tipo, tačiau dažniau IFN- turi privalumų odos ir raumenų audinių ląstelėms. Dėl antiproliferacinio potencialo galioja ši IFN eilutė: IFN-> IFN-> IFN-. Reikėtų prisiminti, kad AP poveikis yra būdingas visam IFN ir visada kliniškai pasireiškia esant didelėms dozėms. Kadangi klinikinis sindromas paprastai yra grįžtama citopenija, rekomenduojama vartoti IFN per parą> 1 mln. TV su hematopoetiniais aktyvatoriais, pavyzdžiui, su leukinferonu.

AP poveikis pasireiškia tik IFN sąveikai su specifiniais receptoriumi, po to giliai sutrinka makromolekulių sintezė. Ląstelės mutantai, kurie prarado receptorius, tampa atsparūs tiek priešvirusiniam, tiek antiproliferaciniam poveikiui. Reikėtų nepamiršti, kad antiproliferacinis poveikis mažomis dozėmis yra citostazinis pobūdis: po IFN pašalinimo ląstelių augimas yra visiškai atkurtas, tačiau tai užtruks ne mažiau kaip 24 valandas [30, 31].

Remiantis daugybe pastabų [32], buvo padaryta išvada, kad antiproliferacinis IFN poveikis yra ypač ryškus parengiamuoju laiko tarpu (G etapas0, G1, G2), todėl ląstelės, kurių šis laikotarpis yra trumpas, ir DNR sintezė (S-periodas) yra intensyvi arba jie yra mitozės (M-fazės) fazėje, yra mažiau jautrūs.

Yra žinoma, kad citoplazmoje yra tam tikras bazinis 2 ', 5'-oligoadenilato lygis, kuris yra būtinas proliferacijai. Tačiau, daugumoje audinių įvedus IFN, jų kiekis gali padidėti 10-15 kartų. Taigi pelėms, kurioms buvo skiriamas IFN- /, 2 ', 5'-oligoadenilatų lygis blužnyje, plaučiuose, kepenyse ir, kiek mažiau, kraujagyslėje ir smegenyse pradeda didėti per 2-5 valandas [33]. Šiuo atveju Daudi citoplazmoje atsiranda nauji baltymai, kurių molekulių masė yra 15, 16, 20, 53, 79, 87 ir 105 kDa, o vienintelis baltymas sumažėja - 23 kDa. Ant mutantinių ląstelių, atsparių tos pačios linijos AP veiklai, aišku, kad nėra tik vieno baltymo, 15 kDa. Kitų baltymų kiekis yra gerokai sumažintas, tačiau jie vis dar yra aptiktos. Tuo pačiu metu c-myc ląstelių pro-onkogeno išraišką taip pat slopino IFN [34].

Iki šiol žinoma, kad žmogaus genomoje yra apie 40 ląstelinių proto-onkogenų, kurie yra išreikšti tik embrioninėse ląstelėse, tačiau yra mažai aktyvūs brandžiose. Pagal paskelbtus duomenis, pavyzdžiui, Xenopus laevis per kiaušialąstės brendimą kiekvienoje iš jų kaupiasi 8 milijonų kopijų geno su-myc, subrendusių kiaušinių etapas lygio taip pat išliko labai aukštas - 5 milijonai vienetų, bet tada po apvaisinimo jie pasiskirsto dalijimosi ir kiekvienoje kampelyje jau yra tik 20-50 kopijų c-myc, t. y. apie tą patį kaip žmogus.

Žmogaus genomoje c-myc mažai išreikštas brandintose ląstelėse. Tačiau embriogenezėje, taip pat chirurginėse operacijose atsiranda kito genezės, c-myc ir kitų augimo onkogenų c-ras ir c-abl atstatymo ir regeneravimo procesai. Šie proto-onkogenai yra absoliučiai būtini dauginimosi procesui. Augimo proto-onkogenų aktyvinimas stimuliuoja ląsteles pereinant nuo fazės G0/ G1 į vėlesnius ląstelių ciklo etapus - S, G2 ir mitozė (M). Tačiau audinių augimas yra genetiškai apibrėžtas ir griežtai kontroliuojamas, dalyvaujant augimo faktoriams, kontaktiniam slopinimui ir apoptozės veiksniams [22]. Pagrindinė augimo pro-onkogenų ekspresijos reguliatorius yra p53 baltymas, kurio genas yra plačiai paplitęs žinduolių genomoje.

Kraujo donorytės sistemos ląstelėse p53 geno ekspresija sukelia fiziologinį reiškinį - užprogramuotą mirtį - apoptozę. Apsaugo šį baltymo bcl-2 genu. Todėl padidėjo išraiška protooncogenes augimo sudaro sąlygas nekontroliuojamai augimo ir piktybinių navikų (ypač taškines mutacijas, transformavimo Proto-onkogeno į onkogeno, arba, kai įtrauktas į viruso genomo ir virusinės aktyvinantis poveikio). Jie taip pat sumažina jų ekspresiją veikiant IFN arba p53 (Rb baltymas, kuris čia nėra svarstomas) slopina augimą ir proliferaciją. Tačiau, žinoma, šie procesai neapsiriboja tik tuo, kad jie yra daug sudėtingesni.

Po naviko transformacijos turėtų atsirasti c-myc ir kitų augimo onkogenų aktyvacija. Įdomu tai, kad norint išlaikyti transformuotą fenotipą būtina nuolat kontaktuoti onkogenų ekspresiją ir atitinkamą oncoproteinų buvimą citoplazmoje. Onkoproteinų įvedimas į įprastą ląstelę sukelia fenotipinių transformacijos požymių atsiradimą, kurie pradeda dingsti, kai onkoproteinai skaidosi. Antikūnų prieš antikūnus įvedimas į transformuotų ląstelių citoplazmą taip pat sukelia laikiną fenotipiškai normalių ląstelių atkūrimą. Taigi, transformuota ląstelė, kuri prarado savo specifines funkcijas (diferencijavimą) ir kuriai būdingas nekontroliuojamas augimas, tuo pačiu slopinant augimo onkogenų ekspresiją IFN įtaka, gali būti grąžinta į fenotipinę normą. Labai svarbu žinoti kiekvieną gydytoją.

Yra keletas būdų, kaip aktyvuoti korinio proto-onkogenų - taškines mutacijas, genomo stiprinamos kaupimosi transkriptų arba galutinai Translokacijas turinčios genų aprašytas lėtine mieloidine leukemija (c-abl 09:22 genas) arba Burkito limfomos (genų-myc 08:14) [35]. Transliuojamą geną veikia naujas promotorius ir jis gali būti aktyvuotas. Svarbų vaidmenį gali atlikti onkogeniniai virusai, pernešanti šiuos onkogenus (paprastai su nedideliais pakeitimais) ir galintys juos įterpti į genomą. Tačiau nėra jokių abejonių, kad p53 geno taškinės mutacijos, kurios yra mažiausiai 50% JAV ir Anglijoje būdingų navikų ląstelių, yra labiausiai tikėtinos žmogaus navikams [36]. Manoma, kad p53 geno mutacijos faktas, mažinantis augimo onkogenų aktyvumo kontrolę, sukuria sąlygas auglio augimui. Jų klinikiniai simptomai turėtų būti laukiami iki 30 metų, kai įsijungia kiti signalai arba susilpnėja priešvėžinio imuniteto mechanizmas.

IFN gebėjimas išvengti priešvėžinių procesų yra neginčijamas, jei tik dėl poveikio augimo onkogenų išraiškai. Bet jie visai neištirti.

1984 m. Pirmą kartą naudojant Daudi ląstelėse c-myc geno pavyzdį buvo įrodyta, kad I tipo IFN gali būti laikomas neigiamu augimo onkogenų ekspresijos reguliatoriumi, kuris bent iš dalies paaiškina AP poveikį įprastuose audiniuose [37]. Vėliau šis poveikis buvo pastebėtas ir kito c-Ha-ras augimo onkogeno atveju. Šis efektas dažniau būna pasiekiamas onkogeno vertimo lygyje (baltymų lygis). Naudojant c-myc pavyzdį, buvo įrodyta, kad p62 kDa DNR surišantis baltymas, kuris yra c-myc produktas, yra reikalingas Okazaki DNR fragmentų susimaišymui į vieną spiralę. Jo slopinimas su IFN įvedimu apsaugo nuo naujos DNR sintezės, po to slopinamas proliferacija.

Tačiau yra ir kitų replikacijos slopinimo pavyzdžių, neturinčių ryškios įtakos augimo protonogenų (ląstelių monocitų serijos I-937, HL-60, Draugo eritrollekemijos, Balb c / 3T3) ekspresijai. Šiame procese svarbus vaidmuo gali būti 2 ', 5'-oligo (A) sintetazės-RNazės L sistema, užtikrinanti greitą naujai sintezuotos mRNR nykimą, reikalingą proliferacijai [38].

Imunomoduliacinis poveikis

Beveik visą dešimtmetį IFN preparatai buvo naudojami kaip antivirusiniai agentai, kurie gali apsaugoti ląstelę nuo virusinės infekcijos be imuninių efektorių dalyvavimo. Nors jau dabar keletas klinikinių stebėjimų, pavyzdžiui, žaizdų reabilitacinių procesų stimuliavimas, įskaitant labai užkrėstus procesus [39, 40] ir dideli nudegimai [41], netinka į bendrą schemą ir reikalauja naujo mąstymo [2].

Didžiulį susidomėjimą pritraukė Olandijos "Primate" centre atliktas tyrimas, kuris parodė, kad beždžionės užsikrėtė labai jautria vakcinos viruso ar jo mutanto, atspariu IFN, kurios organizme praktiškai neįmanoma pasiekti (> 10 tūkst. TV), ir vėliau IFN gydant, pastebėto skirtumo tarp išsivysčiusio imuniteto klinikinės dinamikos ir intensyvumo nebuvo. Abiem atvejais IFN trukdė virusinei žalai. Tai parodė dominuojantį IFN aktyvuoto imuninio efektoriaus vaidmenį viruso eliminavimo procese ir tolesniam klinikiniam išgyvenimui.

Šiandien galima teigti, kad nespecifinių ląstelių imuninio atsako įjungimas ir imuninio atsako efektorių reguliavimas, atrodo, yra pagrindinė IFN funkcija organizme [4]. Kai sąveikauja su patogene, IFN gamina makrofagai ir limfocitai, atsiranda uždegiminė reakcija, dėl kurios sutelkiamas ligos sukėlėjas sunaikinamas su minimaliu pažeidimu įprastų audinių. Yra žinoma, kad normalią sveikatą palaiko daugiausia nespecifinės ląstelinių imuniteto reakcijos, kurias vykdo žinomos imuniteto efekto triados: makrofagai, T-helper limfocitai ir neutrofiliniai fagocitai. Tokiu atveju makrofagai laikomi universalia antigeną pateikiančia ląstele (APC), pateikiant apdorotą antigeną į T limfocitą kartu su aktyvinančiais citokinais. AIC vaidmenį taip pat atlieka dendrito ląstelės ir Langerhans ląstelės (oda). Tačiau šio reiškinio esmė nepasikeičia. AIC įveda kompleksiškai apdorotą antigeną su pagrindine histologinio suderinamumo komplekso (MHC) 2 klase (virusų ir navikų antigenais kompleksu su MHC 1 klase), kuriuos turi atpažinti SD3 + limfocitų T-ląstelių receptoriai (TCR). Yra žinoma, kad apdoroto antigeno imunogeniškumas padidėja maždaug 10 000 kartų, o 100 antigenų + MHC kompleksų gali sąveikauti su 18 000 TCR [42]. Tai charakterizuoja imuniteto pripažinimo veiksmingumą.

Antigeno vaidmenį gali atlikti bet koks patogenas, kuris pirmą kartą užmušamas peroksido žudymo reakcijomis, po to pernešamas. Vėlesnės nespecifinės reakcijos reakcijos parodytos fig. 1. Veikiant antigenui, makrofagas turi būti aktyvuotas, gaminantis autokrinis INF-a ir IL-6. MHC 2 klasės antigenai nėra nuolat išreikšti makrofagomis, o jų išvaizda skatina IFN-α ir IL-4. Procesą slopina transformuojantis augimo faktorius TGF-α, kurį taip pat gali gaminti makrofagai. IFN šaltinis visada yra aktyvuotas T limfocitai.

Tiesioginis makrofagų ir T helper limfocitų kontaktas, kuris vyksta per 2 klasės antigeną + MHC ir TCR struktūras, taip pat papildomas transmembraniniais glikoproteinų ICAM. Tai užtikrina imuninio atsako apribojimą, bet nepakanka T limfocitų aktyvavimui. Reikia antrojo signalo, kurį sudaro citokinų kompleksas, gautas aktyvuojamiems makrofagams: jie yra daugiausia IFN-a, taip pat IL-1, IL-6, IL-12, TNF-α, kurie sąveikauja su atitinkamu receptoriumi T helperio ląstelėje.

Įjungtas T helper limfocitas, palaikantis makrofagus, išlaisvina citokinus, tokius kaip IFN- (skatina MHC klasės 2 ekspresiją) ir IL-4 (aktyvuoja MHC klasės 1 genus), MIF ir LIF, kurie išlaiko makrofagus uždegimo ir kolonijas stimuliuojančio šaltinio faktoriai (CSF) - M-CSF ir GM-CSF. Dėl abipusiškai subalansuoto aktyvuotų makrofagų ir T helperio limfocitų poveikio jų aktyvacijos būsena palaikoma ir imuninio atsako amplifikacija pasiekiama paspartinant ankstyvųjų monocitų / makrofagų pirmtakų makrofagų diferencijavimą.

Neutrofilinių fagocitų suvokiami makrofagų (IFN-, IL-1, TNF-α, IL-8, G-CSF ir GM-CSF) ir T helper limfocitų (IFN-, IL-3) aktyvavimo signalai, kurie padeda diferencijuoti ir stimuliuoja fagocitų funkcija. Tai padidina visus fagocitozės parametrus - brandžių segmentuotų neutrofilų skaičių, peroksidų susidarymą, fagocitinį indeksą ir skaičių, taip pat (svarbiausia) fagocitozės užbaigimą. Galime sakyti, kad šis ratas uždaromas.

Pagrindinis neigiamas signalas visai sistemai yra IL-10, kurį gali gaminti tiek makrofagai, tiek T limfocitai. Tačiau pagrindinis reguliavimo vaidmuo šiame procese, atrodo, priklauso nuo T limfocitų. Konkretūs antikūnai negali dalyvauti šiose reakcijose.

Pirmasis imuninio atsako fazės etapas gali būti laikomas visais ląstelinių antigenų eliminavimo reakcijų, susijusių su makrofagais (ar kitais APC), T limfocitais ir neutrofiliniais fagocitais, kuriems nereikia T limfocitų proliferacijos ir diferencijavimo, rinkinį. Jis yra glaudžiai susijęs su sekančiuoju - antruoju etapu, kuris prasideda proliferuojančių T limfocitų lygiu ir nustato pagrindinę kryptį vėlesnėse organizmo reakcijose į patogeną, kai pradeda veikti ląstelinis (arba, visų pirma, ŽPV) arba humorinis imunogenezės kelias.

Pirmasis imuninio atsako fazelis nuolat veikia ir yra, be abejo, pagrindinis trumpas kūno reakcija su mažais patogeniniais krūviais. Jis įsijungia iš karto po antigeno atpažinimo. Jos dalyviai yra imuniniai efektoriai, kurie šiuo momentu yra diferencijuoti, tačiau, kita vertus, ji sukuria pagrindą tolesnėms imuninėms reakcijoms. Pirmojo imuninio atsako fazės reakcijų apsauginis poveikis yra ypač didelis ir, atrodo, gydytojas yra nepakankamas.

Prisijunkite prie savo sąskaitos

A.N. Mozė, Ph.D. drėgnas Mokslas, UAB "BIOTECH-FARM", Sankt Peterburgas

P.I. Baryshnikov, Dr drėgnas. Mokslų fakultetas, prof. Altajaus AGAU, Barnaulas

Citokinų šeimos apima interferonus (toliau - IFN), interleukinus, chemokinus, augimą ir kolonijas stimuliuojančius veiksnius, kurie yra signalizuojančios imuninės sistemos polipeptidų molekulės. Turėdami plačią biologinio aktyvumo spektrą, jie nustato ne tik adekvatų imuninio atsako lygį, bet ir reguliuoja pagrindinių integruotų organizmo sistemų - nervinės, imuninės ir endokrininės - sąveiką.

Daugumos citokinų veiklos struktūra ir mechanizmas yra pakankamai išsamiai aprašyti. Dėl genų inžinerijos metodų ir šiuolaikinės biotechnologijos metodikos daugybė citokinų gaminama rekombinantinių preparatų, identiškų endogeninėms molekulėms, kiekiu, pakankamu jų klinikiniam naudojimui.

Daugybė mikroorganizmų - bakterijų, mielių, virusų - yra naudojamos kaip užsieninės genetinės medžiagos gavėjai, kad gautų rekombinantinių štamų - biotechnologinių produktų gamintojai. Taigi gaunami rekombinantiniai E. coli štamai, gaminantys interferonus, insuliną, augimo hormonus, įvairius antigenus; B. subtilis padermės, gaminančios interferoną; mielės, gaminančios interleukinus ir tt

Rekombinantinių citokinų panaudojimas, užtikrinantis tinkamą ir tikslinę imuninės sistemos sutrikimų medicininę korekciją, padidina imunoterapijos ir gydymo veiksmingumą apskritai. Į kūną patenkantys citokinai kompensuoja endogeninių reguliuojančių molekulių trūkumą ir visiškai atgamina jų poveikį. Tai ypač svarbu sunkios arba chroniškos patologijos sąlygomis, kai tradicinių imunomoduliatorių ar citokinų sintezės induktorių naudojimas yra nenaudingas dėl imuninės sistemos kompensacinių savybių išeikvojimo. Šiuo metu terapija su rekombinantinėmis citokinais yra viena iš perspektyviausių ir vis besiplečiančių imunofarmakologijos sričių.

Taigi, priešvirusinis ir antiproliferacinis poveikis turi pirmojo tipo interferonus (toliau - IFN-α, IFN-β). Atsižvelgiant į šiuolaikines idėjas apie imuninių reakcijų molekulinius mechanizmus, ypatinga vieta priklauso gama interferonui (toliau - IFN-γ) - imuninio atsako reguliuojamam citokinui.

Remiantis rekombinantiniais interferonais, įvairios kompanijos sukūrė vaistus gyvūnams ir žmonėms, kurie naudojami infekcinių ligų, visų pirma virusinių etiologijų, gydymui ir prevencijai.

Rekombinantinis IFN gyvūnų ir žmonių kūne gydant ir užkirsdamas kelią įvairių etiologijų ligoms, suteikia tinkamą ir tikslinę imuninės sistemos sutrikimų medicininę korekciją, papildo endogeninių reguliuojančių molekulių trūkumą ir visiškai atkuriant jų poveikį. Didelis imunokorrektyvus efektyvumas, nuspėjamumas ir jų veikimo selektyvumas yra dėl specifinių receptorių buvimo ląstelėse ir esamų natūralių jų eliminavimo mechanizmų. Farmaciniai preparatai, kurių pagrindas yra rekombinantinis IFN, yra galinga patogenezinės imuninės terapijos agentai, kurie turi tiesioginį pakeitimo poveikį ir įvairius indukcinius efektus. Šiuo metu jie plačiai naudojami infekcinių, onkologinių ir kitų gyvūnų ligų gydymui.

Interferono klasifikacija

Interferonai (IFN, IFN) yra bendras pavadinimas, pagal kurį šiuo metu jungiasi keletas biologiškai aktyvių baltymų ar glikoproteinų, kurių organizmo ląstelėse sintezuojamos panašios savybės per apsauginę reakciją, reaguojant į užsienio agentų invaziją - virusinę infekciją ar antigeninį poveikį. Dėl interferonų ląstelės tampa imuninės nuo viruso.

Interferonai yra daugelio genetinių indukcinių citokinų, turinčių įvairias funkcijas, įskaitant antivirusinį, antiproliferacinį, priešvėžinį ir imunomoduliacinį, grupė.

Šiuo metu yra žinoma daugiau nei 20 IFN, skiriasi pagal struktūrą, biologines savybes ir dominuojantį veikimo mechanizmą. IFN suskirstyta į tris tipus:

• I tipas, žinomas kaip virusinis interferonas, apima IFN-α (leukocitą, sintetintą aktyvintomis monocitomis ir B limfocitais), IFN-β (fibroblastiką, sintezuotą fibroblastais, epitelio ląstelėmis ir makrofagais) ir kitus IFN. Pirmasis tipas (IFN-α, IFN-β) dažniausiai pasižymi antivirusiniu ir antiproliferaciniu poveikiu, o mažesniu mastu - imunomoduliuojančiu poveikiu. Jie gaminami tiesiogiai po susitikimo su patogeniu - jie yra sukelti virusinės infekcijos procese, jų veiksmai yra skirti patogenui lokalizuoti ir užkirsti kelią jo išplitimui organizme. IFN-α ir -β induktoriai yra virusai, RNR (ypač dvigubos jungtys), lipopolisacharidai (LPS), kai kurių bakterijų komponentai. Tarp virusų stipriausi interferono induktoriai yra geno RNR. DNR virusai yra silpni induktoriai (išskyrus poksvirusus).

• II tipas, vadinamas imuniniu, apima IFN-γ (sintezuotą su aktyvintomis T limfocitomis ir NK-ląstelėmis). Pagrindinis antrojo tipo interferonų (IFN-γ) poveikis yra dalyvavimas imuninės reakcijose. Jis jau pradeda gaminti vėlesniuose infekcinio proceso etapuose jau jautriais T limfocitais ir aktyviai dalyvauja specifinio imuninio atsako kaskadoje. Interferonogeninės medžiagos, antigenai, T-mitogenai ir kai kurie citokinai gali sukelti IFN-γ gamybą. Tikslinės IFN-γ ląstelės yra makrofagai, neutrofilai, natūralios žudančios ląstelės, citotoksiniai T limfocitai, kurių IFN-γ savo paviršiuje yra receptoriai. IFN-γ gamyba yra kontroliuojama citokinais. IL-12 ir IL-18 sustiprina jo ekspresiją, o IL-2 prisideda prie CD4 + limfocitų funkcijos, aktyvuojant IFN-γ gamybą. IFN-γ fonas yra visada organizme, net jei nėra infekcijos: pavyzdžiui, interferono būklės analizė sveikiems žmonėms ir gyvūnams rodo, kad visada nustatomas IFN kiekis kraujyje, stimuliuojamas ar užkrėstas, daug kartų padidėja. Tačiau herpes infekcijos metu ir paskutinio naviko proceso etapuose IFN-γ lygis yra nulinis, nes herpes virusas ir vėžinės ląstelės gamina baltymus, kurie blokuoja IFN-γ sintezę. Todėl, kai herpeso viruso infekcija ir vėžys, interferono induktoriai yra beprasmiška, jie turi būti įvedami į kūną iš išorės.

• III tipas buvo aptiktas vėliau I tipo ir II tipo; informacija apie tai rodo III tipo IFN svarbą kai kurioms viruso infekcijoms.

Virusiniai interferonai (IFN-α / β) yra sukelti virusinės infekcijos metu, o II tipo interferonų (IFN-γ) sintezę sukelia mitogeninės arba antigeninės stimuliacijos. Daugelis viruso infekuotų ląstelių rūšių gali sintezuoti IFN-α / β ląstelių kultūroje. Priešingai, IFN-γ sintezuojama tik kai kuriomis imuninės sistemos ląstelėmis, įskaitant natūralias žudikines (NK) ląsteles, CD4 T ląsteles ir CDS citotoksines slopinančias ląsteles.

Antivirusinis interferono poveikis

Interferonai tiesiogiai neveikia viruso. Pagal jų įtaką ląstelė tampa atspari infekcijai. Interferonai yra pirmoji gynybos linija nuo virusinės infekcijos, nes jie pradedami gaminti iš karto po sąlyčio su virusu. Tuo pačiu metu atsako sunkumas yra tiesiogiai proporcingas infekcinei dozei.

Kai kurie virusai gali blokuoti IFV antivirusinį poveikį. Pavyzdžiui, adenovirusai gamina specifinę RNR, kuri neleidžia aktyvuoti baltymo kinazės.

IFN susirišimas su receptoriumi sukelia tris vienu metu vykstančius procesus ląstelėje, kuris baigiasi:

• latentinės endoribonukleazės aktyvacija, dėl kurios sunaikinama virusinė RNR;

• virusinės žinutinės RNR sintezės slopinimas;

• virusinės apvalkalo baltymų sintezės slopinimas.

Šie mechanizmai integruotu antivirusiniu poveikiu, todėl viruso replikacija slopinama.

Imunomoduliacinis interferono poveikis

IFN turi ne tik antivirusinius, bet ir imunomoduliacinius efektus dėl poveikio svarbiausio histologinio suderinamumo komplekso (MHC) receptorių ekspresijai. IFN padidina 1 klasės MHC molekulių išraišką visų tipų ląstelėms, taip pagerindamas infekuotų ląstelių pripažinimą citotoksiniais T limfocitais (CTL). Be to, IFN-γ sustiprina MHC 2 klasės molekulių ekspresiją ant antigeną pateikiančių ląstelių, todėl pagerėja virusinių antigenų pateikimas į CD4 + limfocitus ir aktyvuojamos natūralios žudančiosios ląstelės (NK ląstelės). IFN taip pat skatina fagocitozę.

Citokinų, įskaitant interferonus, imuninio atsako reguliavimas vyksta pagal relės principą, citokino poveikis ląstelėje sukelia kitų citokinų (citokinų kaskados) susidarymą.

Antiproliferacinis interferono poveikis

Antiproliferacinis IFN poveikis paaiškinamas šiais būdais:

• citotoksinių ląstelių aktyvacija;

• padidinta su augliais susijusių antigenų ekspresija;

• antikūnų gamybos moduliacija;

• naviko augimo faktorių veikimo slopinimas;

• slopina RNR ir naviko ląstelių baltymų sintezę;

• ląstelių ciklo lėtėjimas pereinant prie poilsio etapo;

• augimo auglių ląstelių stimuliavimas;

• ribota ginklų platinimo kontrolė;

• naujojo kraujagyslių susidarymo navikoje slopinimas;

• citostatinio aktyvumo biomoduliacija: metabolizmo pasikeitimas ir klirensas;

• įveikti atsparumą vaistams dėl daugelio vaistų atsparumo genų slopinimo.

Interferono antibakterinis poveikis

Pastaraisiais metais buvo įrodyta, kad IFN taip pat turi antibakterinį poveikį, kuris pagrįstas IFN gebėjimu sukelti tam tikrų fermentų aktyvumą paveiktoje ląstelėje.

Be to, IFN-γ antibakterinis vaidmuo susideda iš aktyvių makrofagų, kurie gamina uždegiminius citokinus, taip pat aktyvias deguonies ir azoto formas, prostaglandinus. Šie veiksniai prisideda prie uždegiminio proceso, kuris sukelia bakterijų mirtį, vystymąsi.

Taigi, visi interferonai yra daugiafunkcinių baltymų faktorių grupė, turintys ryškius priešvirusinius ir priešnavikinius efektus. IFN-α turi stipriausią antivirusinį aktyvumą tarp visų interferonų, o IFN-γ turi ryškesnį antiproliferacinį aktyvumą. Visi interferonai turi skirtingo sunkumo imunoreguliacinį poveikį (didžiausias IFN-γ), jie padidina makrofagų, T limfocitų ir NK-ląstelių aktyvumą.

Kitas Straipsnis

Phosphogliv